Blog

المستخلص

        جمعت 203 عينة (مسحة) من مرضى السكري الذين يعانون من قرحة القدم السكري        Diabetic foot ulcers  (DFUs) من المراجعين لتلقي العلاج في مستشفى اليرموك التعليمي والعيادات الخارجية الخاصة وتحت إشراف الطبيب المختص  ولكلا الجنسين. كان105 (51.7٪) من الذكور ، 98 (48.3٪) من الإناث . إنّ الفئة العمرية (46-65) سنة ظهرت لديها أعلى نسبة إصابة بقرحة القدم السكري ، وبنسبة (65٪) ، كان المرضى الذين يعانون من مرض السكري من 3-10 سنوات لديهم معدل الإصابة 63 (55.75٪).

تم إخضاع جميع العينات إلى الزرع الفطري وقد أظهرت نتائج العزل الأولية أنّ 113عينة (56% ) كانت موجبة للعزل الفطري و 90 (44%) سالبة للفحص الفطري. النمو الفطري الإيجابي للعينات السريرية كان عند الإناث 59 (52.21٪) بينما كان عند الذكور 54 (47.78٪.( وفيما يتعلق بالعمر ، كانت الفئة العمرية 46 – 65 هي أعلى نسبة بين الفئات العمرية الأخرى بنسبة 72 (63.71٪) . أما بالنسبة لعدد سنوات التعايش مع مرض السكري ، فقد أظهرت النتائج أن المدة الزمنية 3-10 كانت الأعلى بنسبة 63 (55.75٪) مقارنة بالمدد الزمنية الأخرى.

        بعد إجراء الفحوصات المظهرية والمجهرية  وتأكيد التشخيص بأستخدام VITEK 2 COMPACT System  ، أظهرت النتائج أنّ من بين العزلات الـ 113 عزلة والتي أعطت نتيجة موجبة للنمو الفطري ، أعطت 15 عزلة ممرضة سريرية (13.27٪) نتيجة إيجابية لخميرة C. albicans ، و 66 عزلة (58.40٪) كانت لأنواع مختلفة من Candida sp. ، فيما كانت 32 عزلة (28.32٪) نتيجة سلبية لنمو الخمائر. بينت النتائج أنّ C. albicans كانت في الإناث 60 % أعلى مقارنة بالذكور 40 % .   كانت  C. albicans موجودة بأعلى نسبة لدى الفئة العمرية 46-65 بنسبة (53.33٪) . في هذه الدراســــــــــــــــة كانت المدّة الزمنية لمرض السكري 3- 10 سنوات هي أعلــــى معــــــــــــدل للاصابة  C. albicans بنسبة (60%).

      اظهرت نتائج الكشف عن جينات SAP7, SAP9 لعزلات C.albicans قيد الدراسة ان جميع العزلات الـ 15 حاملة لهذه الجينات . وكانت نتائج اختبار الحساسية للعزلات قيد الدراسة اتجاه المضادات الفطرية Fluconazol، Ketoconazol ، Amphotrecin B  ، Clotrimazol ، بينت النتائج أن المضادين الفطريين Ketoconazol و Amphotrecin B هما الأكثر فاعلية في تثبيط 93٪ من عزلات C. albicans ، بينما مضاد Fluconazol لم يثبط سوى 6.7٪ من العزلات.

        تم تحديد التركيز المثبط الادنى  MIC للمواد النانوية (CuONPs ، ZnONPs  , AgNPs) اتجاه اربعة عزلات C.albicans ، أظهرت نتائج الدراسة أنّ متوسط قيمة MIC للمواد النانوية المستخدمة تراوحت بين( 250 – 62.5 ) مايكروغرام / مل ، اما قيمة Sub MIC فقد كانت  125)-  (31.25. إذ كان MIC لأوكسيد الزنك النانوي كان 250 مايكروغرام/مل ولكل العزلات المنتخبة . MIC لأوكسيد النحاس النانوي لعزلات C. albicans كان 250 مايكروغرام / مل للعزلةCAA1 ، وللعزلات الثلاث المتبقية كان 125مايكروغرام / مل. بينما MIC لـ AgNPs  ضد عزلات albicans.C كان 250 مايكروغرام / مل للعزلة  CAA1، 62.5 مايكروغرام / مل للعزلة CAA2 و 125 مايكروغرام / مل للعزلتين  CAA5,CAA11.

        تم قياس التعبير الجيني لجينات  SAP7, SAP9 في عزلات  C. albicans من خلال real time PCR قبل وبعد المعاملة بالمادة النانوية وبالتراكيز SubMIC الخاصة بكل عزلة ولكل مادة نانوية. أظهرت نتائج الدراسة زيادة التعبير الجيني لجين SAP7 للعزلات الاربع (CAA1,CAA2,CAA5,CAA11) بعد المعاملة بـ ZnONPs مقارنة بالعزلة قبل المعاملة  ، إذ تفوقت العزلة CAA1  في التعبير الجيني على باقي العزلات ، اذ كانت قيمة Fold Change2^-ΔCt  (16.67945) ، فيما أظهرت نتائج التعبير الجيني بالنسبة للجين SAP9  أنّ جميع العزلات حصل لها تثبيط في التعبير الجيني بعد معاملتها بأوكسيد الزنك النانوي مقارنة بالعزلة قبل المعاملة  .

       أظهرت نتائج الدراسة أنّ الجين SAP7 أظهر تثبيطاً في التعبير الجيني في العزلات الثلاث (CAA2,CAA5,CAA11) بعد معاملة العزلات بـ CuONPs.  بينما أظهرت العزلة CAA1 زيادة ملحوظة في التعبير الجيني. أما نتائج التعبير الجيني لجين  SAP 9 ، أظهرت العزلات الاربع المنتخبة تثبيطاً في قيم التعبير الجيني بعد المعاملة بـ CuONPs .

       بينت نتائج التعبير الجيني للجينات قيد الدراسة بعد المعاملة بـ AgNPs أنّ هناك ارتفاعاً في قيم التعبير الجيني لـ SAP7  للعزلتين CAA1,CAA11  وتثبيطاً في قيم التعبير الجيني للعزلتين CAA2,CAA5 ،  فيما أوضحت نتائج التعبير الجيني لـ SAP 9 بعد المعاملة بـ AgNPs، أنً هناك ارتفاعاً في قيم التعبير الجيني للعزلتين CAA1,CAA11 وتثبيطاً في قيم التعبير الجيني للعزلتين CAA2,CAA5.

      بينت نتائج اختبار السمية الخلوية MTT للجسيمات النانوية التي تم الحصول عليها ZnONPs أظهرت فعالية ضد الخط السرطاني A375 مقارنة بالخلايا الطبيعية HdFn   ، كانت قيمةIC₅₀    اتجاه A375 33.41 µg /mL بينما  كان IC₅₀  تجاه الخلايا HdFn  الطبيعية  481.1 µg  /mL .  أظهرت CuONPs   فعالية اتجاه A375 اذ كانت قيمة  IC₅₀ 139.5 µg /mL ، من جهة اخرى كان IC₅₀  تجاه الخلايا HdFn  الطبيعية 304.2  µg /mL . AgNPs أظهرت فعالية ضد الخط السرطاني A375 مقارنة بالخلايا الطبيعية HdFn    إذ كانت قيمة IC₅₀ 15.5 µg /ml تجاه A350، من جهة اخرى كان IC₅₀  تجاه الخلايا HdFn  الطبيعية  300.5 µg /ml.