المستخلص
جُمعت 250)) عينة سريرية من الأفراد الذين كانوا يعانون أمراضاً مختلفة، وشملت العينات الادرار ((121 عينة والقشع ((78 عينة والجروح (34) عينة والحروق (17) عينة، جمعت العينات للمدة من كانون الاول 2022 ولغاية حزيران 2023 من مـسـتـشـفـى بـعـقـوبـة الـتـعـلـيـمـي/ ديالى.
أُخضعت العينات جميعها إلى الزرع البكتيري، وقد أظهرت النتائج إن 158 عينة (63.2%) كانت موجبة للزرع البكتيري، في حين إن 92 عينة (36.8%) كانت سالبة للزرع البكتيري، شخصت العزلات باستخدام الطرق الميكروبيولوجية وتأكيد التشخيص باستخدام VITEK2 compact system، أظهرت النتائج أن 57 )36.08%( من الـعــزلات تعود إلى بكتيريا Klebsiella pneumoniae، إذ بلغت نسبتها في الادرار 35 (28.92%)، وفي القشع 15 (19.23%)، وفي الجروح 5 (14.70%)، وفي الحروق 2 (11.76%).
أظهرت نتائج اختبار فحص الحساسية أن عزلات بكتيريا K.pneumoniae تمتلك مقاومة اتجاه مضادات مجموعة البيتالاكتام هي (Ampicillin 100%، Piperacillin 100%، Cefoxitin 87.71%، Imipenem 26.31، Meropenem 28.07%). بينما بلغت مقاومتها اتجاه مضادات الأمينوكلايكوسيد (Gentamicin40.35%، Amikacin50.87%، Streptomycin 80.70%) وكانت نسبة المقاومة لمضادات الكينولونات، إذ قاومت مضادات (Levofloxacin 35.08% ، Ofloxacin 31.57% )، أما مضاد Trimethoprime – sulfamethox فبلغت نسبة المقاومة 64.91 %.
أظهرت نتائج اختبار حساسية المضادات الحيوية أن 20 (35.08%) من عزلات بكتيريا K.pneumoniae هي عزلات متعددة المقاومة للمضادات الحيوية (MDR) Multidrug resistance، وبينت النتائج أن 4 (7.01%) عزلات منها مقاومة لأكثر من ثلاث مجاميع من المضادات الحيوية Extensive drug resistance (XDR). حُدِّد تركيز المثبط الأدنى (MIC) للمضاد والمعزز الحيوي، إذ تراوحت قيمة (MIC) لمضاد Ciprofloxacin (8-1024) مايكروغرام/مل، وعند معاملة العزلات تأزرياً بالمعزز الحيوي والمضاد فقد تم مزجهما بنسبة 1:1.
أظهر الكشف الجزيئي باستخدام تقنية التفاعل سلسلة البوليميريز PCR))، لجين 16S rRNA ل(22) عزلة من عزلات K.pneumoniae قيد الدراسة إذ وجد أن جميع العزلات المتعددة المقاومة للمضادات الحيوية (MDR) كانت تمتلك جميع هذه الجينات وبنسبة (100%).
أظهر الكشف الجزيئي باستخدام تقنية التفاعل سلسلة البوليميريز PCR))، لجينين من جينات المحفظة ل (22) عزلة من عزلات K.pneumoniae قيد الدراسة إذ وجد إن عزلة واحدة فقط كانت تمتلك الجين K1 وبنسبة (4.54%) في حين أظهرت نتائج الدراسة الحالية إن جميع عـزلات K.pneumoniae لـــم تـمـتـلـك جين rmp A وبنسبة (0%).
بينت نتائج الكشف الجزيئي لمجموعة من جينات مضخات الدفق (acrA, oqxA, oqxB) في هذه البكتيريا إن جميع عزلات K.pneumoniae (22) المتعددة المقاومة للمضادات الحيوية (MDR) كانت تمتلك جميع هذه الجينات وبنسبة (100%).
أما عن جينات المضادات الحيوية فقد بينت نتائج الكشف الجزيئي عن هذه الجينات (gyrA, qnrB) إن العزلات (22) جميعها المتعددة المقاومة (MDR) التابعة لبكتيريا K. pneumoniae تمتلك الجين gyrA وبنسبة (100%). وإن (6) من العزلات المتعددة المقاومة (MDR) التابعة لبكتيريا K. pneumoniae تمتلك الجين qnrB وبنسبة (22.72%).
عزلت بكتيريا Lactobacillus spp. من منتجات الألبان، وشخصت مجهرياً وبالاختبارات الكيموحيوية إذ استخدمت هذه البكتيريا كمعزز حيوي بعد معاملته مع عزلتين من بكتيريا K.pneumoniae.
قِيس الـتـعـبـيـر الـجـيـنـي بـاستخدام تــقــنـيـة تـفـاعل سلسلة البوليميريز الـلـحـظـي الـكـمـي (RT-PCR) للجينات (gyrA,OqxB,AcrA,K1) لعزلتين مختارة من عزلات K.pneumoniae المتعددة المقاومة من مصادر مختلفة، وهذه العزلتين كانت العزلة (U4) المعزولة من الادرار والعزلة (S2) المعزولة من القشع، وبعد حساب قيمة Folding = بينت النتائج أن جميع هذه الجينات أظهرت تعبيراً جينياً؛ إذ كانت قيمة متوسط Folding (1) ولمعرفة تأثير بالمعزز الحيوي على التعبير الجيني للجين gyrAللعزلتين، وبعد معاملتها بسلسلة من الـتـخـافـيـف للمعزز الحيوي وحسـاب قـيـمـة التركيز تحت المثبط الأدنى subMIC. أظهرت نتائج الدراسة الحالية تثبيط في التعبير الجيني لجين gyrA للعزلتين (U4, S2) بعد المعاملة بـالبروبايوتك ومقارنتة بالـ Control، نتائج التعبير الجيني للعزلتين ذاتها بعد معاملتهما بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومقارنتها بالـعزلتين قبل المعاملة؛ إذ حصل تثبيط في التعبير الجيني بالنسبة للعزلة (U4) بعد معاملتها بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين، وارتفاع في التعبير الجيني بالنسبة للعزلة (S2) بعد معاملتها بالسبروفلوكساسين وتثبيط في التعبير الجيني بعد معاملة العزلة بالمعزز الحيوي ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين، إذ كانت قيمة متوسطة Folding = للعزلتين قبل المعاملة (1) وبعد المعاملة العزلتين (U4, S2) مع المعزز الحيوي (0.79) و (0.17) وبعد معاملة العزلتين ذاتها مع السبروفلوكساسين (1.40) و(0.13) وبعد معاملتهما بمزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين (0.49) و (0.24).
أظهرت نتائج الدراسة الحالية إن التعبير الجيني لجين 1K للعزلة (U4) وبعد معاملتها بالمعاملات نفسها؛ إذ حصل له ارتفاع في التعبير الجيني بعد معاملتها بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين مقارنة بالـعزلة قبل المعاملة، إذ كانت قيمة متوسطة Folding = للعزلتين قبل المعاملة (1) وبعد معاملة العزلة (U4) مع بالمعزز الحيوي (2.71)، وبعد معاملتها مع السبروفلوكساسين (12.52) وبعد معاملتها بمزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين (7.04).
أما بالنسبة لجين AcrA فقد وجد تثبيط في التعبير الجيني للعزلتين (U4, S2) بعد المعاملة بالمعزز الحيوي ومقارنتة بالـ Control، نتائج التعبير الجيني للعزلتين ذاتها بعد معاملتهما بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومزيج بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومقارنتها بالـعزلتين قبل المعاملة، إذ حصل تثبيط في التعبير الجيني بالنسبة للعزلة (U4) بعد معاملتها بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين، وإرتفاع في التعبير الجيني بالنسبة للعزلة (S2) بعد معاملتها بالسبروفلوكساسين وتثبيط في التعبير الجيني بعد معاملة العزلة بالمعزز الحيوي ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين؛ إذ كانت قيمة متوسطة Folding = للعزلتين قبل المعاملة (1) وبعد المعاملة العزلتين (U4, S2) مع المعزز الحيوي (0.02) و (0.08) وبعد معاملة العزلتين ذاتها مع السبروفلوكساسين (1.84) و (0.08) وبعد معاملتهما بمزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين (0.55) و(0.23).
أظهرت نتائج الدراسة الحالية تثبيط في التعبير الجيني لجين OqxB للعزلتين (U4, S2) بعد المعاملة بالمعزز الحيوي ومقارنتة بالـ Control، نتائج التعبير الجيني للعزلتين ذاتها بعد معاملتهما بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومقارنتها بالـعزلتين قبل المعاملة، إذ حصل تثبيط في التعبير الجيني للعزلتين (U4, S2) بعد معاملتهما بالمعزز الحيوي والسبروفلوكساسين ومزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين، إذ كانت قيمة متوسطة Folding = للعزلتين قبل المعاملة (1) وتثبيط للعزلتين (U4, S2) بعد المعاملة مع المعزز الحيوي (0.51) و (0.25) وتثبيط العزلتين ذاتها بعد المعاملة مع السبروفلوكساسين (0.89) و (0.15) وبعد معاملتهما بمزيج المعزز الحيوي والسبروفلوكساسين (0.39) و (0.71).
