الدكتور عدنان ياس خضير عباس التدريسي في كلية الطب بجامعتنا يهدي الامانة العامة للمكتبة المركزية نسخة من رسالة الماجستير وأطروحة الدكتوراه كجانب دعم المكتبة المركزية ودعم الباحثين .. رسالة الماجستير بعنوان ( تأثيــر المســـتحلب الحـــيوي المــنتج مــن بكــــتريا Leuconostoc mesenteroides ssp. cremoris المعزولة محليا ً في البكتريا المرضية المعزولة من ادوات القسطرة واصابات المجاري البولية )
المستخلص
جمـعت عينـات مـن الحـليب البقري الخام و عيــنات مــن اللبن الرائب لغـرض عــزل
بكــتريا spp. Leuconostoc، وبــعد زرع هــذه العينـات علــى الاوســـاط الزرعـــــية
امكن الحــصول علـى (28) عزلة تعــود لجـــنس Leuconostoc ، (21) عــزلة مـنها
كانت مــن عـــينات الحــليب البقــري الخام ، فيــما تم الحصول علـى (7) عــزلات مــن
عينات اللبن الرائب ، اختـبرت قابلية العــزلات جميـعها علـى انتاج المـســــتحلب الحــيوي
(Biosurfactant (، وكانت 11 عزلة فقط منتجة للمستحلب الحيوي ، وأُخضعت الــعزلات
المــنتجة له للفـحوصات الزرعية والمجهرية والكيموحيوية وشخصت حتى النوع بأســتعمال
نظام Vitek2 . اظهرت النتائج ان جميعها تابعة لتحت النوع Leuconostoc mesenteroides
ssp . cremoris .
درست الفعالية السطحية لراشح وراسب عزلات بكتريا Leuconostoc المنتجة للمسـتحلب
الحيـوي ، وبينت النتائج تباين الفعالية السـطحية لراشـح وراسـب العـزلات المـنتجة للمسـتحلب
الحيـوي اذ تراوحـت اقطار مناطق ازاحة الزيـت للراسـب والراشح ما بين (4 – 7) مليمتر .
درسـت ايضا الظـروف المـثلى لإنتاج المســتحلب الحيـوي مـن حيث درجـة الحـرارة و الرقـم
الهيدروجيني و ظروف التهوية والتنمية لأوقات حضن مختلفة فضلا عن نـسبة اللقاح . وكانـت
التنمية تحت الظروف الهـوائية وبدرجة حـرارة 30 م ₒ ولمدة (24) سـاعة ورقم هيدروجيني 6
وبنسـبة لقـاح 2% مناسبة لإنتاج المستحلب الحيوي .
شملت الدراسة ايضاً استخلاص المستحلب الحيوي خارج الخلوي وكذلك المرتبط بالخلايا
للعزلة المنتخبة Leuconostoc mesenteroides ssp. cremoris (LY4) وتنقيتهما جــزئياً
بطـريقة الترسـيب بالأسـيتون البارد ، وحـدد وزن كــل منهما ودرســت الفعالية الســطحية
لهما . امكن الحصول على ناتج مستحلب حيوي خارج خلوي بلغ 10.8 غرام /1.2 خــلايا
جافة / لتر وسـط زرعي ، و 0.34 غرام /1.2 خلايا جافة / لتر وسط زرعي للمستحلب الحيوي
المرتبط بالخلايا . ابدى المستـحلب الحـيوي المنقى جزئياً (خارج الخلوي والمرتبط بالخلايا)
فعالية سـطحية متمثلة بقـطر ازاحة زيت بلغ (10) مليمتر .
تم اخذ عينات من ادوات القسطرة البـولية للمرضى الرجال الراقدين في مستشفى الشهيد
غازي التابعة لمدينة الطب في بغداد لغـرض عزل البكتريا الملوثة لتلك الادوات ، فضــلا
عـن جمع عـزلات لبعض مسببات أصابات المجاري البولية البكتيرية من عينات الادرار ،
أُخضعت هذه العزلات للفحوصات الزرعية والمجهرية والكيموحيوية وشخصت حتى النوع
بأســتعمال نــظام Vitek2 ، بينــت نتائج التشــخيص الحــــصول علـــــى (38) عــــزلة
مصدرها ادوات القسطرة البولية رمز لها (C) ، كانت (15) منها تعود للنوع Escherichia
coli ، و (5) عــــزلات تعـود للنــوع Proteus mirabilis و (3) عزلات تعود للـــنوع
Pseudomonas aeruginosa ، فيـما كانت (10) منها تعود للنـوع Staphylococcus
epidermidis و (5) تعــود للنـوع Staphylococcus aureus ، اما الـعزلات التي مصـدرها
اصابات المــجاري البولية والتــي رمز لها (U) فــقد توزعــت بواقــع (3) عــزلات للنــوع
Escherichia coli و (3) للنــوع aeruginosa Pseudomona وعــزلة واحــدة تعــود
للنـوع Staphylococcus aureus . اخـتبرت حـسـاسية هـذه العـزلات للمضادات الحيوية ،
وكشف عن قابليتها على تكوين الغـشاء الحـيوي . وابدت تلك العـزلات تبايناً في حــساسيتها
للمضادات الحيوية قيد الدراسة بأستثناء تشابه جميع العـزلات في حساسيتها لمضـاد Imipenem
، وكذلك تميزت بمقاومتها لمضاد Aztreonam باستثناء عزلات بكتريا S. epidermidis ،
وبخصوص قابلية العـزلات البكتيرية على تكوين الغـشاء الحيوي ، فقد تمكنت (14) عزلة من
مجموع (18) عزلة تعـود لبكتريا E.coli و (3) لكـل من عـزلات بكتـريا S.aureus و P.
mirabilis و aeruginoa .P . فيـما تمكنت (5) من مجـموع (10) عـزلات تعـود لبكـتريا
epidermidis S.من تكوين الغشاء الحيوي .
كما درسـت فعـالية المســتحلب الحـيوي خارج الخـلوي المنـقى جزئيـا فـي تثـبيط نمـو
البكـتريا المعزولة مـن ادوات القسطرة البولية واصـابات المـجاري البـولية والتـي تتصــف
بمقـاومتها للمـضادات الحيوية وتكوينها للغشاء الحيوي من خلال تحديد التركيز المثبط الادنى
، كما درس تأثير المسـتحلب الحيوي المنقى جزئيا في تثبيط تكوين الغشاء الحيـوي للعزلات
البكتـيرية نفـسها وبطريقـتي النمو المشترك والتغطية المسبقة . اظهر المستحلب الحيوي المنقى
جزئياً فعلاً مضاداً لنمو البكتريا المرضية ، اذ بلغ التركيز المثبط الادنى له تـجاه بكتريا
P. aeruginosa (C1) و (U1) S. aureus و ( S. epidermidis (C1 (256) ملغرام / مليلتر
فيما بلــغ (64) ملغرام / مليلـتر تجــاه بكــتريا P. aeruginosa (U2) و S. aureus (C1)
. فيــــما بلـغ (32) ملـغرام / مليلـــتر تجـــاه بكــتريا P. mirabilis (C3) و E. coli (C13)
، اما بالنــسبة للعزلة (E. coli (U3 فـقد بلغ التــركيز المــثبط الادنى (128) ملغرام/ مليلتر
، وتباينت فعـــالية المـــستحلب الحـــيوي المـــنقى جـــزئياً المـــضادة لتكــوين الغشاء الحيوي
تبعاً لنوع العزلة البكتيرية ونوع الطريقة المـستـعملة ، بـينت النتائج عند اســتعمال طريقة
النمو المـشـترك ان عزلات P. aeruginosa (C1) و (P. aeruginosa (U2 الأكـثر تحـسساً
للمستحلب الحيوي المنقى جزئياً ، اذ بلغت نسبة تثبيط تكوين الغشاء الحيوي (92 و91)% على
التوالي ، ثـم تلتها عـزلات بكـتريا E.coli (C13) و (S.aureus (C1 و S. aureus (U1) ،
بنسبة تثبيط (87 و 79 و59 ) % علـى التـوالي ، فيـما بلغت اقل نـسبة تثبيط للعزلتين P.
mirabilis (C3) و E.coli (U3) بنـسبة (25) % لكـل منهما ، اما عـند اسـتعمال طـريقة
التغطية المــسـبقة كـانت بكــتريا P. aeruginosa (C1) و S.aureus (C1) و S. epidermidis
(C1) الأكـثر تحســـساً للمسـتحلب الحيوي المنقى جزئياً ، اذ بلغت نـسبة تثبيط تكوين الغـشاء
الحيوي (88 ، 71 ، 69 ) % على التوالي ، فيما ثبط تكوين الغـشاء الحـيوي لبكـتريا E.coli
(C13) بنسبة (62)% ، وكانت اقل نسـبة تثبيط لتكـوين الغـشاء الحيوي لبكتريا P. mirabilis
(C3) بنسبة (20)% .
كما بينت النتائج قدرة المستحلب الحيوي المنقى جـزئياً على تثبيط تكوين الغشاء الحيوي
للبكتريا المرضية على ادوات القسطرة البولية ، وكانت بكـتريا P. aeruginosa و E.coli
الأكثر تحسساً للمستحلب الحيوي المنقى جزئياً ، اذ بلغت نسبة التثبيط للغشاء الحيوي (43 ،
54) % على التوالي ، ثم تلتها بكتريا mirabilis P. و aureus . S و epidermidis S.
بنسبة تثبيط (39 ، 38 ، 35)% على التوالي .
أطروحة الدكتوراه بعنوان ( استخلاص وتنقية وتوصيف الليفان المنتج من بكتريا leuconostoc mesenteroides ودراسة تاثيره على خميرة candida albicans )
