المستخلص
نُفذت عدة تجارب على نبات الستيفيا في مُختبر زراعة الأنسجة النباتية التابع لكُلية الزراعة جامعة ديالى للفترة من تشرين الثاني/ 2021 – اذار/ 2023، تضمنت تعقيم الأجزاء النباتية و إكثار النبات نسيجياُ خارج الجسم الحي، إضافة إلى محاولة إستحثاث الكالس من أوراق النبات، و تجارب زيادة محتوى النبات من الستيفيوسايد باستخدام نوعين من مُفاعلات الغمرالمؤقت ودور بعض المُحفزات في زيادة المحتوى. ففي تجارب التعقيم استخدمت تراكيز من هيبوكلورات الصوديوم (5 و10 %) و لثلاث مدد زمنية ( 10 و15 و20 دقيقة)، وأظهرت نتائج التعقيم فروقاً معنوية بين المعاملات، إذ تفوق التركيز 10% للمدد الزمنية الثلاث، بإعطاء أعلى نسبة مئوية للتعقيم بلغت 100%، متفوقاً على التركيز 5% وللمدد الزمنية الثلاث، فيما لم تختلف المدد الزمنية معنوياً فيما بينها للتركيز نفسه. في تجارب الإكثار الدقيق للعقد المفردة اُستخدم BA بالتراكيز 0.0 و0.5 و 1.0 و 1.5 و 2.0 ملغم لتر-1، أَشارت نتائج التضاعف في الوسط الصلب إلى تفوق معاملة المقارنة (0.0) معنوياً على جميع المعاملات إذ أعطت أعلى متوسط لارتفاع النبات بلغ 5.4 سم ، أما نتائج التضاعف لصفة عدد الأفرع فتُشير النتائج إلى تفوق التركيز 1.0 ملغم لتر-1 من BA معنوياُ على معاملة المقارنة فقط بنسبة بلغت 3.5 فرع نبات-1 أما بقية المعاملات فلم تختلف معنوياً، وتجربة استخدام تراكيز من Kin بالتراكيز 0.0 و 1.0 و 2.0 و 3.0 و 4.0 ملغم لتر-1، اذ اشارت النتائج الى تفوق معاملة المقارنة معنوياً على جميع المعاملات باعطاء اعلى متوسط لطول الاوراق بلغ 5.4 سم ملغم لتر-1 وتفوق التركيز 0.1 ملغم لتر-1 معنوياً على معاملة المقارنة ومعاملة 2.0 ملغم لتر-1 باعطاء اعلى متوسط لعدد الافرع بلغ 2.2 فرع نبات-1 وايضاً اعطى التركيز 1.0 ملغم لتر-1 اعلى متوسط لعدد الاوراق بلغ 9.6 ورقة فرع-1 متفوقاً بذلك معنوياً فقط على معاملة 2.0 ملغم لتر-1 .
في تجارب استحثاث الكالس فتم استخدم الأوكسين NAA بالتراكيز0.0 و 1.0 و 2.0 و 3.0 ملغم لتر1 وايضا استخدام تراكيز من 2,4-D هي0.0 و 1.0 و 2.0 ملغم لتر-1. أَشارت نتائج استحثاث الكالس إلى تفوق التركيزين 2.0 و3.0 ملغم لتر-1 NAA بإعطاء أعلى نسبة مئوية للكالس بلغت 100% ،في حين أن 2,4-D بالتركيز 1.0 ملغم لتر-1 أعطى أعلى نسبة للكالس بلغت 50%.
أما في تجارب المُفاعلات الحيوية فتضمنت عدة تجارب أولها كان تجربة اضافة نوعين من السايتوكاينين (BA و Kin) في المفاعل المُصنع مختبرياً باضافة تركيزين من البنزل ادنين هي 1.0 و2.0 ملغم لتر-1 مع تركيزين من Kin هي 2.0 و 4.0 ملغم لتر-1 مع معاملة المقارنة (0.0)، واظهرت النتائج تفوق معاملة المقارنة معنوياً باعطاء اعلى متوسط لارتفاع النبات بلغ 4.8 سم، في حين تفوقت جميع المعاملات معنوياً في صفة عدد الافرع على معاملة المقارنة واعطى التركيز 1.0 ملغم لتر-1 من BA اعلى عدد افرع بلغ 3.2 فرع نبات-1، في حين تفوق التركيز 1.0 ملغم لتر-1 من BA معنوياً فقط على معاملة 2.0 ملغم لتر-1 من BA باعطاء اعلى متوسط للاوراق بلغ 17.1 ورقة فرع-1. كذلك تجربة إضافة تراكيز من السكروز هي 30 و 60 و 90 غم لتر-1 متداخلاً مع BA بالتركيز 0.0 و 1.0 ملغم لتر-1، وأيضاً تجارب استخدام حامض السالسلك بالتراكيز 10 و 20 و 30 ملغم لتر-1 في مُفاعلات الغمر المؤقت المستورد والمُصنع مختبرياً.
بينت نتائج تحليل الستيفيوسايد إلى تفوق معاملة الوسط الصلب الحاوِ على BA بمقدار 84.21 مايكروغم غم-1 على معاملات المقارنة (Free)، ولم تتفوق على النبات الحقلي المؤقلم. وأَشارت نتائج تحليل HPLC لمعاملات السكروز إلى تفوق التركيز 90 غم لتر-1 من السكروز متداخلاً مع BA في إعطاء أعلى تركيز للستيفيوسايد بلغ 171.02 مايكروغم غم-1. بَينت نتائج إضافة حامض السالسلك إلى تفوق التركيز 30 ملغم لتر-1 في زيادة محتوى الستيفيوسايد خارج الجسم الحي إذ بلغ 599.78 مايكروغم غم-1 وزن جاف في مُفاعل الغمر المؤقت المُصنع مختبرياً و387.10 مايكروغم غم-1 وزن جاف في مُفاعل الغمر المؤقت المستورد.
