Blog

المستخلص

جمعت 250 عينة سريرية مختلفة شملت الحروق، والجروح، والإدرار، والدم، ومسحات الأنف، والأذن الوسطى، والحنجرة، والقشع من مرضى راقدين وآخرين مراجعين لمستشفى البتول للولادة والأطفال ومستشفى بعقوبة التعليمي في محافظة ديالى لكلا الجنسين وبأعمار مختلفة أثناء المدة من تشرين الثاني / 2023 لغاية آذار/ 2024، وقد تم الحصول على 80 عزلة بكتيرية من تلك العينات شخصت على أنها Staphylococcus aureus وفقاً لخصائصها المظهرية والزرعية والكيموحيوية. وقد تم تأكيد تشخيص العزلات وفقاً لنظام التشخيص Compact System Vitek 2 .

درست حساسية العزلات البكتيرية اتجاه 21 من مضادات الحياة بإستعمال طريقة Kirby-Bauer ، وقد أشارت النتائج الى أن جميع العزلات أظهرت أعلى مقاومة بنسبة 90% لمضاد Oxacillin و87.25% penicillin و86.25% لكل من Amoxicillin وCeftriaxone ، و Methicillin  بنسبة 82.5% ومضاد Ampicillin بنسبة 78.75% وأما المقاومة للمضادين Erythromycin  وAzithromycin بنسبة 67.5% لكلا المضادين، وبالنسبة للمضادات Spectinomycin وTetracyclines و Levofloxacin فقد كانت نسبة المقاومة 66.25%، 63.75%، 42.5% على التوالي، وأظهرت جميع العزلات مقاومة أقل لكل من المضادينCiprofloxacin  ، Trimethoprim-Sulfamethoxazole بنسبة 40%، وكانت المقاومة لمضادات  Amikacin، Gentamycin ، Clindamycin بنسبة 38.75 %  ، 37.5% ، 30% على التوالي، وأما المضاداتTobramycin ، Streptomycin ومضاد Chloramphenicol فكانت العزلات أقل مقاومة بنسبة 26.25% ، 23.75% ، 13.75% على التوالي ، وأظهرت العزلات أقل مقاومة لمضاد Vancomycin بنسبة 12.5% وأظهرت جميع العزلات مقاومتها لمضاد Linezolid بنسبة 11.25%.

تبيّن وجود نسبة عالية من بكتريا Staphylococcus aureus المقاومة المتعددة للمضاد (MDR)، إذ إن نسبة 61 (76.25%) تم تأكيدها على أنها MDR إذ كانت مقاومة لمضاد واحد على الأقل من ثلاث أو أكثر من مجاميع المضادات الحيوية قيد الدراسة و7 (8.75%) على أنها XDR اذ قاومت جميع الفئات باستثناء واحدة أواثنتين من مجاميع المضادات الحيوية، والباقي 12 (15%) تم اعتبارها  عزلات حساسة MDS، إذ قاومت 1-2 من مجاميع المضادات الحيوية او حساسة لجميع المضادات .

أُخضعت جميع عزلات المكورات العنقودية الذهبية S.aureus لاختبار البكتريا المتحملة للمضاد وكانت النتيجة 29 عزلة وبنسبة 36.25%  يمكنها الاستمرار والبقاء على قيد الحياة ، و 51 عزلة بنسبة 63.75% على أنها غير متحملة للمضاد .

أظهرت نتائج الكشف المظهري عن بعض عوامل الضراوة قابلية العزلات المدروسة على إنتاج أنزيم بيتا هيمولايسين وإنزيم مخثر البلازما، والإنزيم المميع للجيلاتين بنسبة 100% ، فيما بين نتائج الكشف عن قابلية بكتريا S.aureus على إنتاج إنزيمات البيتا-لاكتاميز β-Lactamase بنسبة 34(42.5%)، 51(63.75%) ،62 (77.5%)  لكل من إنتاج إنزيمات البيتالاكتاميز واسعة الطيف (ESβL) وإنزيمات البيتالاكتاميز المعدنية (MβL) وإنزيمات البيتالاكتاميز  الصنف) C Amp^C).

أشارت النتائج الى أنَّ جميع العزلات البكتيرية وبنسبة 100% كانت منتجة للغشاء الحيوي بمستويات مختلفة باستخدام اطباق المعايرة الدقيقة، إذ تميزت 47 عزلة بإنتاجيتها القوية للغشاء الحيوي بنسبة 58.75% فيما كانت هناك 20 عزلة ذات أنتاجية متوسطة بنسبة 25% و 13عزلة ذات أنتاجية ضعيفة بنسبة 16.25% .

 فيما بيّنت نتائج الدراسة الجزيئية باستخدام تقنية تفاعل البلمرة  المتسلسل امتلاك العزلات المدروسة لبعض جينات الضراوة والمقاومة،  إذ  تم استخلاص الحامض النووي DNA لـ16عزلة من عزلات S.aureus ، وأظهرت النتائج امتلاك عزلات بكتريا S. aureusلجين spa بنسبة 13(81.2%) ، جين pvl   بنسبة 4(25%) ، جين mecA ينسبة 16(100%) ، جين vanA و vanB بنسبة 5(31.25%) ، جينات bla_VIM   و bla_TEM   و bla_SHV و bla_CTX-M بنسبة 2(12.5%) لجميع الجينات، وأما جين bla_OXA و sul1 بنسبة 6(37.5%) ولكلا الجينين وفي حين آخر كانت نسبة ظهور10 (62.5%) لجيني aac(6′)-Ie-aph(2″)-Ia وant(4´)-Ia ، و 4(25%) لجين aph(3´)-IIIa و SulII و qnrA ، وبينما أظهرت العزلات نسبة 8 (50%)  لجين  qnrB.

أظهرت نتيجة التحليل التتابعي للتحري عن النمط الجيني للبروتين السطحي A لجينspa (spa typing) وحساب المكررات المترادفة  لجين spa  (spa tandem repeats)  باستعمال برنامج (spa Typer) عبر الموقع الالكتروني https://spatyper.fortinbras.us   وبين التحليل التتابعي بعد التأكد من تتابعات القواعد المكررة للجين باستخدام  https://www.ridom.de/spaserver ظهور ثلاث أنماط مختلفة للجين، وهي t037 وبنسبة 8(66.68%) و2(16.66%) لكل من النمطين t14870 وt044.

 تم التحري عن بعض جينات الانتكرون ، وهو منظم لعوامل التعبير الجيني في بكتريا S.aureus وتضمنت هذه الجينات (intI1) class-1 integron-integrase بنسبة7(43.75%)وجين HS5  بنسبة 16(100%)،وجينHS4   و MRG المشفر للانتكرون البيئيبنسبة 14(87.5%)و6 (37.5%) على التوالي .   

  تم إجراء التحليل التتابعي Sequencing DNA لجينات الانتكرون الصنف الأول intI1 و HS5 وHS4   و MRG لست عزلات ، وتم مطابقتها مع العزلات العالمية على موقع NCBI وتحليل الانتكرون السريري والبيئي وتحديد نوع النمط الجيني حسب شريط الجينات الموجود في عزلات  S.aureus ، إذ ظهرت النتيجة وجود تسعة أنماط مختلفة عند تحليل الانتكرون السريري ، إذ بيّنت النتائج نسبة 1(16.7%) ،  هي من نوع Complete integron  ولكل نمط من الأنماط الجينية  rep intI1 DfrA5  qacEΔ1 sul1 ، intI1TidD merA  ، intI1 Glucoside hydrolase ، intI1 Succinate hydrolase ، intI1 Metal dependent hydrolysis و intI1 bla_CTX-M ،  وأما نسبة 2(33.3%)  فكانت من النوع Complete integron  ، وذات نمط جيني  rep intI1 DfrA5 qacEΔ1 ABC transporter و rep intI1 DfrA5 qacEΔ1  ، وأما النوع CALIN element والذي يحمل النمط الجيني ABC transporter ، والنوع In0 element ذو نمط جيني intI1 كان بنسبة 2(33.3%)  و 5(83.3%)  على التوالي، وأما بالنسبة للتحليل التتابعي للانتكرون البيئي فقد تبين وجود نوعين مختلفين من الأنماط ، وهي In0 element ذو النمط الجيني intI1 والنوع Complete integron للنمط الجيني rep Acts وبنسبة 5(83.3%) و 1(16.7%) على التوالي.