المستخلص
تُعد بكتيريا الزائفة الزنجارية (Pseudomonas aeruginosa) النوع الرئيس من جنس الزائفة المسبب للعدوى لدى الإنسان. وتعمل هذه البكتيريا باستمرار على تطوير آليات مبتكرة للتحايل على تأثير المضادات الحيوية المستخدمة في علاج الأمراض التي تسببها.
تم جمع 200 عينة سريرية من المرضى المراجعين للمؤسسات الصحية الحكومية في مدينة بعقوبة بمحافظة ديالى خلال المدة من تشرين الأول إلى كانون الأول 2025.
أظهرت النتائج أنه من بين 200 عينة سريرية تم عزل 29 عزلة من بكتيريا الزائفة الزنجارية. وقد تم تأكيد تشخيص جميع العزلات من خلال الاختبارات الزرعية والمجهرية و الكيموحيوية و باستخدام جهاز Vitek-2 Compact (شركة Biomerieux / فرنسا). وشملت العينات الحروق والجروح والقشع. كما بينت النتائج أن النمو البكتيري ظهر في 159 عينة (79.5%)، في حين لم يظهر أي نمو في 41 عينة (20.5%).
سُجلت أعلى نسبة لعزل بكتيريا الزائفة الزنجارية في عينات الجروح بواقع 13 عزلة (44.8%)، تلتها عينات القشع بواقع 10 عزلات (34.5%)، ثم الحروق بواقع 6 عزلات (20.7%). كما تم الكشف عن انتشار البكتيريا لدى الجنسين، إذ أظهرت النتائج أن 12 عينة من أصل 99 عينة للذكور (41.38%) كانت موجبة للبكتيريا، في حين كانت 17 عينة من أصل 101 عينة للإناث (58.62%) موجبة، مما يشير إلى أن نسبة الإصابة كانت أعلى لدى الإناث مقارنة بالذكور.
أظهرت نتائج اختبار الحساسية تجاه 13 مضاداً حيوياً أن العزلات السريرية من الزائفة الزنجارية أبدت أعلى معدلات مقاومة لكل من Ticarcillin/Clavulanic acid وGentamicin بواقع 26 عزلة (89.7%) لكل منهما. تلتها مقاومة Piperacillin وAztreonam وTobramycin بواقع 13 عزلة (44.8%) لكل منها. كما سُجلت مقاومة لمضاد Cefepime في 11 عزلة (37.9%)، بينما أظهرت المضادات Ceftazidime وImipenem وMeropenem وCiprofloxacin مقاومة في 10 عزلات (34.5%) لكل منها. أما أقل معدلات المقاومة فقد لوحظت مع Levofloxacin وNorfloxacin بواقع 9 عزلات (31.0%) لكل منهما، في حين بلغت المقاومة لمضاد Piperacillin/Tazobactam 7 عزلات (24.1%). ومن بين العزلات التسع والعشرين، تم تصنيفها إلى ثلاثة أنماط وفقاً لمقاومتها للمضادات الحيوية؛ إذ كانت 6 عزلات (20.7%) متعددة المقاومة للمضادات الحيوية (MDR)، و10 عزلات (34.5%) شديدة المقاومة للمضادات الحيوية (XDR)، بينما كانت 13 عزلة (44.8%) غير متعددة المقاومة (Non-MDR). كما تم حساب مؤشر المقاومة المتعددة للمضادات الحيوية (MDRI) لكل عزلة اعتماداً على نتائج اختبار الحساسية، وتراوحت قيمه بين 0.07 و1.0، مع وجود عزلات بقيم أكبر من أو مساوية أو أقل من 0.2.أظهرت نتائج الكشف الظاهري عن إنزيمات β-lactamase في بكتيريا الزائفة الزنجارية أن 19 عزلة (65.5%) كانت موجبة لإنتاج إنزيم Metallo-β-lactamase (MBL) من أصل 29 عزلة، في حين كانت 10 عزلات (34.5%) سالبة. كما تم التعرف على 3 عزلات (10.3%) منتجة لإنزيمات ESBL، بينما كانت 26 عزلة (89.66%) سالبة. أما بالنسبة لإنتاج إنزيم AmpC فقد أظهرت النتائج أن 12 عزلة (41.4%) من أصل 29 عزلة كانت قادرة على إنتاج هذا الإنزيم.
استُخدمت طريقة Ethidium Bromide Cartwheel للكشف الظاهري عن نشاط مضخات التدفق (Efflux Pumps)، وأظهرت النتائج أن 9 عزلات (45%) كانت موجبة لنشاط المضخات؛ منها عزلتان موجبتان عند جميع تراكيز صبغة الإيثيديوم بروميد و7 عزلات موجبة عند تراكيز مختلفة. في المقابل كانت 11 عزلة (55%) غير فعالة من حيث نشاط مضخات التدفق عند جميع التراكيز المختبرة. كما كشفت نتائج التشخيص الجزيئي باستخدام تقنية PCR عن وجود جين mexB-oprM في 100% من العزلات البكتيرية.
وأظهرت تجارب استخدام الحمض النووي الريبي المتداخل الصغير (siRNA) وجسيمات الكيتوسان النانوية وجسيمات الكيتوسان النانوية المحملة بـ siRNA والموجهة لتثبيط جين mexB-oprM في بكتيريا الزائفة الزنجارية حدوث انخفاض معنوي في مستوى التعبير الجيني لكل من mexB وoprM، إذ تم قياس التغير في التعبير الجيني بواسطة تقنيةqRT-PCR. وقد بلغت قيم التغير النسبي (Fold Change) للجينات في معاملة siRNA (0.0006، 4.4229) و(6.4755، 0.0032)، وفي معاملة الكيتوسان (0.00000003، 0.000001) و(0.000002، 0.000006)، وفي معاملة جسيمات الكيتوسان النانوية المحملة بـ siRNA (0.00000001، 0.000000008) و(0.000005، 0.0000008) مقارنة بعزلات السيطرة.
وأكدت الاختبارات المظهرية حدوث انخفاض في إنتاج مضخات التدفق ونمو العزلات المعاملة. ويؤدي تثبيط هذه المضخات إلى تقليل ضراوة بكتيريا الزائفة الزنجارية، إذ تُعد من أهم الآليات المسؤولة عن مقاومة المضادات الحيوية والإمراضية في هذه البكتيريا، مما يجعلها أكثر عرضة للتخلص المناعي. وتُظهر هذه الدراسة أن استهداف مضخات التدفق باستخدام siRNA وجسيمات الكيتوسان النانوية وجسيمات الكيتوسان النانوية المحملة بـ siRNA يمثل نهجاً علاجياً واعداً لتثبيط عوامل الضراوة الرئيسة في بكتيريا الزائفة الزنجارية، مما يفتح آفاقاً جديدة لعلاج الإصابات الناجمة عنها.
