المستخلص
تعد بكتريا الإشريشيا القولونية Escherichia coli أحد أسباب الأكثر شيوعاً للعدوى البكتيرية ، و هي ذات مقاومة عالية للمضادات الحيوية ، و يرجع ذلك لامتلاكها عوامل ضراوة تساعدها على الالتصاق و تطور العدوى و التسبب في إمراضية الكائنات الحية الدقيقة ، هدفت هذه الدراسة الى التحري الجزيئي عن بعض جينات Van المسؤولة عن مقاومة مضاد الفانكومايسين في بكتريا Escherichia coli المعزولة من عينات سريرية و بيئية . شملت الدراسة جمع (140) عينة سريرية تضمنت (93) عينة أدرار لمرضى يعانون من التهابات المسالك البولية و (21) عينة أدرار مرضى الفشل الكلوي و (15) عينة من مسحات الجروح و (11) عينة من مسحات حروق من مستشفى بعقوبة التعليمي ومستشفى بلدروز العام ،كما وتم جمع (71) عينة ماء من مختبر الصحة العامة قسم الاغذية في محافظة ديالى لفترة من (1 كانون الأول 2023 ولغاية 30 اذار 2024) . تم تشخيص العزلات البكتيرية بالطرائق الزرعية و المجهرية و الاختبارات الكيموحيوية فضلاً عن جهازVitek، إذ أظهرت نتائج الزرع على وسط MacConkey agar و وسط Eosin Methylene Blue (EMB) و وسط HI Chrome E.coli agar، إن 44 عزلة بكتيرية تعود لبكتريا E.coli بحيث شملت (38 عزلة سريرية و 6 عزلات ماء) .
أوضحت نتائج فحص الحساسية ل 44 عزلة بكتريا E.coli ل 11 مضاد حيوي هي Vancomycin ، Ampicillin ، Amoxicillin ، Amikacin ،Gentamicin Ciprofloxacin ، Norfloxacin ، Cefotaxime ، Cefoxitin ، Meropenem ، Imipenem ) كانت اعلى نسبة مقاومة لمضاد Vancomycin إذ بلغت نسبة مقاومة 38(100%) عزلة سريرية 6(100%) عزلات ماء يليه مضاد Ampicillin 33(86.84%) عزلة سريرية 6(100%) عزلات ماء ، Amoxicillin 33(86.84%)عزلة سريرية 5(83.33%) عزلات ماء ، Cefotaxime 32(84.21%) عزلة سريرية 4(66.66%) عزلات ماء ، Norfloxacin 19(50%) عزلة سريرية 2(33.33%) عزلة ماء ،
Ciprofloxacin 17(44.73%) عزلة سريرية 2(33.33%) عزلة ماء، Cefoxitin 13(34.21%) عزلة سريرية بينما لم تظهر اي عزلة مقاومة لعينات ماء، Gentamicin 8(21.05%) عزلات سريرية1(16.66%) عزلة ماء ، Amikacin 3(7.89%) عزلات سريرية بينما لم تظهر أي عزلة مقاومة لعينات ماء ، أما بالنسبة للمضادين Meropenem و Imipenem لم تظهر اي عزلة مقاومة للعزلات السريرية و الماء . تضمنت الدراسة أيضاً الكشف المظهري عن بعض عوامل الضراوة Virulence Factors ل 25 عزلة بكتريا E.coli ذات مقاومة متعددة للمضادات الحيوية اذ تم الكشف عن تكوين الغشاء الحيوي و انزيمات البيتا-لاكتاميز المعدنية و انزيمات البيتا-لاكتاميز واسعة الطيف ، إذ بينت نتائج تكوين الغشاء الحيوي Biofilm بطريقة أطباق المعايرة Micro Titter plate، إن 25 عزلة بكتريا E.coli قادرة على تكوين الأغشية الحيوية و بدرجات متفاوتة منها 6(24%) عزلات سريرية مكونة للأغشية الحيوية المتوسطة و 13(52%) عزلة سريرية مكونة للأغشية الحيوية الضعيفة و 4(16%) عزلات ماء مكونة للأغشية الحيوية القوية و 2(8%) عزلة ماء مكونة للأغشية الحيوية المتوسطة . وان 1(%4) عزلة سريرية و 2(8%) عزلة ماء مكونة لأنزيمات البيتا-لاكتاميز المعدنية . و5(20%) عزلات سريرية و 1(4%) عزلة ماء مكونة لأنزيمات البيتا-لاكتاميز واسعة الطيف .
اظهرت نتائج الكشف الجزيئي باستخدام جين 16SrRNA ل 11 عزلة بكتيرية (3,4,5,8,11) عزلة سريرية و (20,21,22,23,24,25) عزلة ماء حيث كانت جميع العزلات حاملة لجين 16SrRNA بنسبة (100%) و بعدها ارسلت نتائج PCR ل (8) عزلات (3,4,5,8,11) عزلة سريرية و (20,21,22) عزلة ماء الى المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية National Centre for Biotechnology Information (NCBI) لغرض عمل تسلسل للعزلات إذ ظهرت (3) عزلات جديدة عزلتين من إدرار ذات Accession number (PP977164) و (PP977166) و عزلة من ماء ذات Accession number (PP977172) تم تسجيلها في مركز (NCBI) بعدها تم عمل شجرة تطورية للعزلات المسجلة . بينما أظهرت نتائج الكشف
الجزيئي لبكتريا E.coli لجينات Van ل 25 عزلة بكتريا E.coli إنَّ نسبة ظهور جين Van A (36%)9عزلات إذ ظهر في (7)عزلات سريرية و (2) عزلة ماء و (16%)4 Van B عزلات إذ ظهر (2) عزلة سريرية و (2) عزلة ماء و Van C لم تظهر أي حاملة لهذا الجين
