المستخلص
تضمنت الدراسة الخالية الكشف و تنقية مركب الأرتيميسينين من نبات الشيح الأبيض Artemisia herba alba الذي تم جمعه من مدينة بعقوبة في محافظة ديالى. هدفت الدراسة الحالية اختبار تأثير مستخلص نبات الأرتيميسينين كمضاد للميكروبات وعلى تكاثر الخلايا الليمفاوية في الدم البشري وعلى ثلاثة خطوط من الخلايا السرطانية، وكذلك اختبار تأثيره على انقسام الخلايا عن طريق التأثير في الأنابيب الدقيقة لدراسة موت الخلايا المبرمج. تم العثور على النطاق الخطي لتقدير مادة الأرتيميسينين بين 0.6 و60 ميكروغرام/مل، مع حد اكتشاف قدره 0.18 ميكروغرام/مل، بواسطة HPLC للكشف عن نتيجة مادة الأرتيميسينين التي تظهر العينة في 0.01 مل المحقونة في HPLC هي 95.5جزء في المليون مع وقت استبقاء 283.15. في أوراق النبات Artemisia herba-alba . الكشف الكيميائي لبعض المكونات الكيميائية لمستخلص أوراق النبات تبين أن النبات يحتوي على مجموعة من المركبات النشطة مثل ، الفينولات، الفلافونويدات، التربينات والجليكوسيدات .
تم الكشف عن النشاط المضاد للبكتيريا الأرتيميسينين ومقارنته بالمستخلص المائي للنبات باستخدام طريقة الانتشار بالحفر، وأظهرت النتائج في مادة الأرتيميسينين أن أعلى منطقة تثبيط عند 200 ميكروغرام/مل لوحظت في S.aureas المكورات العنقودية 26 ملم وE.coliاشريشا كولاي 17 ملم، تليها كلبسيلا الرئوية K. pneumonia،الزواحق الزنجارية P. mirabilis وP.aeruginosa بقطر تثبيط (15، 16,18) ملم على التوالي. لوحظت أعلى منطقة تثبيط عند تركيز 200 ميكروغرام/مل في المستخلص المائي في S.aureas، والتي بلغت (19) ملم، تليها E. coli وK. pneumonia عند قطر التثبيط (13 و 14) ملم، على التوالي، بينما في وP. mirabilis وP.aeruginosa لوحظ التأثير للمستخلص المائي عند 200 ميكروغرام/مل هو 15 ملم و 16 ملم على التوالي.
أما الاختبار الثاني فقد تضمن تأثير مستخلص الأرتيميسينين على انقسام خلايا الدم الليمفاوية البشرية مقارنة بالاستخلاص المائي حيث تم تعريض الخلايا لسلسلة من التراكيز المحضرة من مستخلص الأرتيميسينين. وأظهرت أن المستخلص يثبط انقسام الخلايا الليمفاوية في دم الإنسان في الطور الاستوائي بنسب مختلفة. وتزداد نسبة الانقسام المتوقف مع زيادة التركيز، وتراوحت نسبة الخلايا المثبطة في الطور الاستوائي بين 0.15 – 2.23% للتراكيز من 6.25 إلى 200 ميكروغرام/مل من مادة الأرتيميسينين. وتراوحت النسبة المئوية للخلايا المثبطة في الطور الاستوائي بين 0.12 – 1.15% للمستخلص المائي من النبات.
تقييم السمية الخلوية لمستخلص المائي والأرتيميسينين ضد الخلايا السرطانية، تم إجراء فحص السمية الخلوية على ثلاثة خطوط من الخلايا السرطانية: HepG2، MCF7، وMEF. وتم قياس تثبيط نمو الخلايا كنسبة مئوية. أظهرت النتائج أن كلا من المستخلص المائي والأرتيميسينين أظهرا تأثيرات مثبطة على نمو جميع خطوط الخلايا السرطانية الثلاثة. بالنسبة لخط خلايا HepG2، أظهر المستخلص المائي تثبيطًا ملحوظًا للنمو بدءًا من تركيز 6.25 ميكروجرام/مل، مع معدلات تثبيط تصل إلى 72.12% عند 200 ميكروجرام/مل. كما يثبط مادة الأرتيميسينين نمو خلايا HepG2، حيث تصل معدلات التثبيط إلى 92.19% عند 200 ميكروجرام/مل. في خط الخلايا MCF7، أظهر كل من المستخلص المائي والأرتيميسينين تأثيرات مثبطة، حيث أظهر المستخلص المائي معدلات تثبيط أعلى قليلاً في جميع التركيزات مع معدلات تثبيط تصل إلى 79٪ عند 200 ميكروغرام / مل. كما يثبط مادة الأرتيميسينين نمو خلايا MCF7، حيث تصل معدلات التثبيط إلى 96.42% عند 200 ميكروجرام/مل. بالنسبة لخط الخلايا الطبيعي MEF، أظهر كلا المركبين تأثيرات مثبطة أضعف مقارنة بخطوط الخلايا HepG2 وMCF7. أظهر المستخلص المائي تثبيطًا ملحوظًا بدءًا من 50 ميكروجرام/مل الى 200، حيث كانت 02.80% الى 10.86 بينما يتطلب تثبيط الأرتيميسينين 05.81% عند 200 ميكروجرام/مل للحث على تثبيط كبير.
تم دراسة تاثير المستخلص المائي والأرتيميسينين على شبكة الأنابيب الدقيقة وتكاثر الخلايا في خلايا HepG2 التي تعبر عن التوبولين المسمى GFP. تُظهر اللوحات صورة مجهرية لخلايا HepG2 المعالجة بجميع المستخلصات المائية. تأثير المستخلص المائي والأرتيميسينين على الأنابيب الدقيقة المغزلية وتكاثر الخلايا في خلايا HepG2 يبدأ التثبيط بتركيز 25 ميكروغرام/مل في تأثير المستخلص المائي في الأنابيب الدقيقة المغزلية وتكاثر الخلايا 1.09 أكثر مع التركيز، والأنيبيبات الدقيقة بتركيز عالي 1.17 بالمقارنة مع السيطرة، كان الكولشيسين 2.89 مشابهًا جدًا لخلايا السيطرة، على الرغم من عدم محاذاة عدد قليل من الكروموسومات في لوحة الطورية. في مادة الأرتيميسينين، يبدأ التثبيط بتأثير 12.5 ميكروغرام/مل (0.09) في الأنابيب الدقيقة المغزلية وتكاثر الخلايا، وفي التركيزات 200 ميكروغرام/مل – 1.89 مقارنة مع الكولشيسين الضابط 2.89 الذي يعطل الأنابيب الدقيقة المغزلية. أظهرت النتائج أن مستخلص الأرتيميسينين من Artemisia herba- alba له تأثير مضاد للميكروبات ومضاد للأورام ويمكن أن يحفز موت الخلايا المبرمج في الخلايا السرطانية.
