You are currently viewing رسالة ماجستير منتظر عامر / بعنوان: التحليل الجزيئي لجينات الاغشية الحيوية والمقاومة الواسعة للأدوية في بكتريا الراكدة البومانية المعزولة من عينات سريرية وتاثير المعززات الحيوية على التعبير الجيني

رسالة ماجستير منتظر عامر / بعنوان: التحليل الجزيئي لجينات الاغشية الحيوية والمقاومة الواسعة للأدوية في بكتريا الراكدة البومانية المعزولة من عينات سريرية وتاثير المعززات الحيوية على التعبير الجيني

المستخلص

ظهرت في الآونة الأخيرة بكتريا Acinetobacter baumannii متعددة المقاومة للأدوية (MDR) وانتشرت على نطاق واسع، مسببة مشكلات صحية كبيرة على الصعيدين المحلي والعالي، ارتبطت بكونها بكتريا انتهازية وعادة ترتبط بإصابات العدوى المكتسبة في المستشفيات في مختلف البلدان والتي من ضمنها العراق أيضا، ولوحظ مؤخرا زيادة في الإصابات داخل المستشفيات العراقية ببكتريا A. baumannii ذات المقاومة الشديدة.

تم جمع مئة (100) عينة سريرية من المرضى الداخليين والزوار في مستشفى بعقوبة التعليمي بمحافظة ديالى خلال الفترة من نوفمبر 2024 إلى مارس 2025. جاءت العينات من مصادر سريرية مختلفة، بما في ذلك الحروق، والجروح، وقروح القدم السكري، والتهابات المسالك البولية. أظهرت نتائج الدراسة أن A. baumannii وُجدت في 30 عينة. وأظهرت التوصيفات الكيميائية الحيوية أن العزلات كانت موجبة للكيتلاز، سالبة للأوكسيداز، سالبة للإندول، وسالبة للاختبار الميثيل ريد. تم تأكيد هوية A. baumannii باستخدام نظام التشخيص VITEK 2، حيث شكلت العزلات 30% من إجمالي العينات المجمعة. أما توزيع العزلات البالغ عددها 30 عزلة حسب مصدر العينة فكان الأعلى في عينات الجروح مع 10 عزلات (33.33%)، تلتها عينات الحروق مع 9 عزلات (30%)، ثم عينات قروح القدم السكري مع 7 عزلات (23.33%)، وكان الأدنى في عينات التهابات المسالك البولية مع 4 عزلات (13.33%).

اظهرت اختبارات حساسية المضادات الحياتية على 30 عزلة ان البكتريا ذات مقاومة تامة للمضادات الحيوية صنف البيتا لاكتام ومنها Cefoxitin، Cefepime، Augmentin، Ceftazidime و Piperacillin بنسبة 100% مقاومة. وأيضا نسبة مقاومة 100% لمضادات الحياتية الفلوروكوينولون والتي شملت Levofloxacin، Ofloxacin، Norfloxacin و Ciprofloxacin. كما أظهرت عائلة الكاربنيمات المتمثلة بالمضاد الحيوي Imipenem مقاومة كاملة 100%.  خلاف ذلك أظهرت مضادات عائلة الامينوكلايكوسايد معدل مقاومة متفاوت حيث أظهرت Amikacin 76.7%، Gentamicin 86.7% و Kanamycin 96.7%. وقد وجد ان مضادات الحياتية Tetracycline و Chloramphenicol مقاومة قليلة 60% و 70% على التوالي. وقد وجد ان البكتريا صنفت حسب مقاومتها لعوائل المضادات الحياتية الى MDR (26.67%) و XDR (73.33%).

أظهرت نتائج الدراسة الحالية في اختبارات عوامل الضراوة ان حميع عزلات البكتريا كونت الغشاء الحيوي المتوسط والقوي بنسبة (26.66%) و (73.33%) على التوالي. بينت النتائج المظهرية النسبة الأعلى في انتاج انزيم MBL 21 عزلة (70%)، وكان انتاج انزيم ESBLs 17 عزلة كانت موجبة (56.66%)، وكانت نتائج اختبار انزيم AmpC هي الأقل حيث كانت 14 عزلة (46.66%) فقط منتجة لهذا الانزيم.

اظهر الكشف الجزيئي في الدراسة الحالية وجود جين qnrB في 12 عزلة من أصل 12 عزلة مختارة للكشف الجيني (100%) وظهر امتلاك جينات qnrA, ompA, CsuE وbla-OXA 51 في 11 عزلة كان بنسبة (91.67%).

أظهرت نتائج المعالجة الحيوية بواسطة Lactobacillus rhamnosus  نتائج تثبيط نمو بكتريا الراكدة البومانية بمنطقة تثبيط (17-22 مم) وفي تأثير تثبيط تكوين الاغشية الحيوية ظهرت الفعالية في التثبيط (20.47%) وفي معالجة التعبير الجيني لجينات CsuE (79.6%) هي الأعلى تأثيرا في تقليل التعبير الجيني وفي جين ompA أظهرت نسبة (53%) لتقليل التعبير الجين وكان الأقل تأثيرا على التعبير الجيني لجين qnrA بنسبة (39%).

تم تسجيل عزلتين من بكتريا الراكدة البومانية كسلالة قياسية في بنك الجينات في المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية وكان رقم الانضمام (PV669007 وPV669008). واظهر تفسير سلسلة جين CsuE تكون إضافة البروبيوتيك قد أدت إلى استبدال نوكليوتيدات واحدة، 856T>A ، داخل أمبليكون العينة التي تم فحصها. هذا SNP مرادف، مما يؤدي إلى عدم حدوث تغيير في الحمض الأميني المشفر. وفقا لذلك، هناك ما يبرر حجم عينة أكبر لتقييم الآثار المحتملة للتعرض للبروبيوتيك على المجموعات البكتيرية قيد التحقيق بشكل أكثر شمولا.

الاستنتاج من الشجرة الوراثية أن عيناتنا التي تم فحصها تم توزيعها وتجميعها في موضع واحد متميز للتطور والتطور في الكتل المتولدة للشجرة. على الرغم من SNP المرصود، فقد احتلت كلتا العينتين نفس موضع النشوء والتطور بجانب ثلاث تسلسلات تم عزلها من السويد (GenBank CP029569.1) وتايلاند (GenBank CP041148.1) وإسبانيا (CP179702.1). وفقا لذلك، تم تحديد الأصول الآسيوية الأوروبية المتعددة للتسلسلات المستخدمة.