المستخلص
أجريت الدراسة الحالية لأيجاد طرق حيوية بديلة لمعالجة البكتريا الشديدة المقاومة للمضادات الحيوية المعزولة الناتجة عن اصابات جلدية وحروق وجروح . تم في هذه الدراسة انتاج المركب الحيوي المكون من غشاء السيليلوز البكتيري المدمج براشح بكتريا المعززات الحيوية (CFS-BC ) وتقييم فعاليته في معالجة بكتريا الراكدة البومانية A. baumanniiوبكترياالمكورات العنقودية الذهبية S. aureus المعزولة من الاصابات المذكورة.
تم عزل 20 عزلة من بكتريا الركدة البومانية و20 عزلة من بكتريا المكورات العنقودية الذهبية من مجموع 230 عينة سريرية وبنسبة 25.6% من مرضى يعانون من حروق وجروح ,شملت كلا الجنسين وبمختلف الاعمار في مستشفى خانقين العام ومستشفى بعقوبة العام للفترة من شهر شباط 2024 الى ايار 2024. تم تاكيد تشخيص العزلات اعتمادا على الصفات المضهرية على الاوساط الزرعية المختلفة والاختبارات البايوكيميائية اضافة الى الخضوع لنظام VITEK 2.
أجري فحص الحساسية وفقا لطريقة Kirby-Bauer ,كما تم التحقق من دقة النتائج باستخدام جهازVITEK 2. اظهرت نتائج الاختبار مقاومة عالية جدا لبكتريا الراكدة البومانية والمكورات العنقودية الذهبية للمضادات الحيوية المختلفة المستعملة في الدراسة وصنفت العزلات اعتمادا على نمط مقاومتها الى نوعين من الفئات XDR وMDR حيث اظهرت بكتريا الراكدة البومانية ان كل العزلات اظهرت نمط MDR وبنسبة(100%) و19عزلة نمط XDR, اما بكتريا المكورات العنقودية الذهبية فقد اظهرت 8 (40%) عزلة نمط XDR و 20 (100%) عزلات نمط MDR.
كما شملت الدراسة الكشف المظهري لبعض عوامل الضراوة التي تمتلكها بكتريا الراكدة البومانية والمكورات العنقودية ومنها انتاج الغشاء الحيوي ,واظهرت النتائج ان 18(90%)عزلة من بكتريا الراكدة البومانية و16(80%) عزلة من بكتريا المكورات العنقودية منتجة للغشاء الحيوي القوي والمتوسط . كما تم الكشف مظهريا عن نتائج انزيمات البيتا لاكتيمايزمن نوع ESBLs وAMPCs و MBLs وكانت النتائج كما يلي : 4(20%) و8(40%) و19(95%) عزلة من بكتريا الراكدة البومانية منتجة ESBLs وAMPCs و MBLs على التوالي , بينما كانت 3(15%) و16(80%) عزلة من بكتريا المكورات العنقودية منتجة لانزيمات ESBLs و MBLs.
تم الكشف الجيني بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل PCR للتحري عن جينات blaOXA51 و bap في 8 عزلات من بكتريا الراكدة البومانية وعن جين mecA و blaZ في 8 عزلات من بكتريا المكورات العنقودية الذهبية جميعها كانت شديدة المقاومة للمضادات الحيوية ومنتجة للغشاء الحيوي القوي. اظهرت النتائج وجود جينات blaOXA51 و bap بنسبة 100% بينما تواجدت جينات mecA و blaZ في 7 عزلات بنسبة 87.5%.
عزلت خمس عزلات من بكتريا Lactobacillus bacteria من منتجات الالبان المحلية و تأكد تشخيص العزلات عن طريق الفحص المجهري الاختبارات البايوكيميائية بالاضافة الى استخدام جهاز2 VITEK واظهرت النتائج ان العزلة (1و5 ) تعود لجنس Lactobacillus plamtarum اما عزلة (2و3و4 ) فتعود لجنس Lactobacillus paracasei ,كما اجريت بعض الاختبارات لتشخيص عزلات Lactobacillus bacteria كمعزز حيوي (probiotic) وتحديد فاعليتها في تثبيط نمو البكتريا السالبة والموجبة لصبغة كرام . اظهرت النتائج ان اعلى منطقة تثبيط كان لعزلة 3 Lac وبمعدل (14-24) ملم و (10-20) ملم تجاه بكتريا الراكدة البومانية وبكتريا المكورات العنقودية الذهبية على التوالي. كما حددت فاعلية عزلات المعزز الحيوي في تثبيط انتاج الغشاء الحيوي لكلا النوعين من البكتريا المرضية واظهرت النتائج قابلية بكتريا المعزز الحيوي في تثبيط تكوين الغشاء الحيوي وبتاثير واضح بنسبة تراوحت (0-100%) .شملت الدراسة الحالية انتاج السيليلوز البكتيري باستخدام وسط محور , وبينت النتائج تكون طبقة غشائية على سطح الوسط ( غشاء السليلوز البكتيري ) وبوزن جاف بلغ (1،8غرام/لتر∓ 0،07) وتم دراسة الخواص الفيزيائية والكيميائية للغشاء المنتج وكانت ماشبهة لخواص الغشاء المنتج بالوسط القياسي Hestrin-Schramm media.
كما شملت الدراسة تحديد فعاليته التثبيطية للمركب Cell Free Supernatant- Bacterial cellulose (CFS-BC) لبكتريا الراكدة البومانية وبكتريا المكورات العنقودية الذهبية داخل المختبر in vitro في جسم الكائن الحي In vivo وتماجراء دراسة نسيجية لجروح مستحدثة في جسم الكائن الحي (ذكور جرذان بيضاء). شملت 64 جرذ اً قسمت عشوائيا الى اربع مجاميع تضمنت كل مجموعة 16 جرذا, تم اصابتها ببكتريا الراكدة البومانية وببكتريا المكورات العنقودية الذهبية. مثلت المجموعة الاولى (السيطرة السالبة ) تركت بدون معالجة, المجموعة الثانية (السيطرة الموجبة) تم معالجتها بمرهم السيلافكس ,المجموعة الثالثة تم معالجتها ببكتريا المعزز الحيوي (probiotic), اما المجموعة الرابعة فقد تم معالجتها بالمركب الحيوي(CFS-BC). وفي هذا المحور تم دراسة جانبين الاول هو دراسة مظهرية للجروح وتتضمن قياس اطوال الجروح وسرعة التئامها و كبح نمو البكتريا المرضية في الجروح في المجاميع الدراسية. اما الجانب الثاني فتضمن دراسة الجروح في المجاميع المذكورة نسيجيا.
اظهرت النتائج انخفاضا في طول جروح المجموعة الرابعة المعاملة بمركب (CFS-BC ) من 1 سم الى (0.02-0.04 سم) للجروح التي اصيبت ببكتريا الراكدة البومانية وبكتريا المكورات العنقودية الذهبية على التوالي حيث كانت الافضل بين المجاميع المعالجة. اظهرت نتائج التحليل الاحصائية ان هناك فروق معنوية عند مستوى احتمالية (P-value≤0.05) في تاثير المواد المستعملة في المعالجة بين المجاميع التجريبة. ايضا تم قياس فاعلية المركب (CFS-BC composite) في كبح نمو البكتريا المرضية في الجروح المستحدثة في الجرذان , واضهرت النتائج انخفاض واضحا لمستعمرات البكتريا المرضية في الجروح ,حيث انخفضت اعداد البكتريا في المجموعة الرابعة المعالجة بمركب (CFS-BC composite) في اليوم الثاني من الاصابة من 152*510 و165*510 لبكتريا الراكدة البومانية والمكورات العنقودية الذهبية الى 3*510 و4*510 في اليوم 12 من الاصابة على التوالي.
تضمن الجانب الثاني من الدراسة داخل جسم الكائن الحي In vivo دراسة الجروح نسيجيا .اظهرت نتائج الفحص المجهري للمقاطع النسيجية الماخوذة خلال ايام المعالجة ان المجموعة الرابعة المعالجة بالمركب الحيوي (CFS-BC) كانت افضل مجموعة من حيث نقصان الخلايا الالتهابية والاوعية الدموية المحتقنة و اعادة بناء النسيج الطلائي للنسيج المجروح ومن حيث قابلية الجرذان على الحركة. اما الحويصلات المكونة للشعر فقد ظهرت في المجموعة الرابعة اسرع من المجاميع الدراسية مما يدل على فاعليته الحيوية في قتل البكتريا المرضية وتسريع عملية شفاء الجروح.
