المستخلص
الجدري هو مرض فيروسي شديد العدوى يصيب الطيور الداجنة والبرية، وينتمي إلى عائلة Poxviridae ، والفصيلة الفرعية Chordopoxvirinae ، وجنس فيروسات Avipox. تؤدي العدوى بفيروس جدري الطيور إلى ظهور آفات عقيدية تكاثرية على الجلد و / أو آفات خناقية على الأغشية المخاطية في الجهاز الهضمي والجهاز التنفسي. تهدف هذه الدراسة إلى التعرف على وجود فيروس جدري الطيور في الدجاج والحمام في محافظة ديالى بالعراق. تستخدم الدراسة الفحص النسيجي المرضي والكشف الجزيئي باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل لتحديد الاصابة الفايروسيه. بالإضافة إلى ذلك ، تهدف الدراسة إلى التحقيق في التسلسل الجيني وإجراء تحليل تطوري لفيروس جدري الطيور ، وكذلك العلاقة بين السلالات العراقية المحلية والسلالات المسجلة من بنك الجينات (NCBI).
تم جمع أربعين نموذج من الحمام نوع (Columba livia domestica) من مختلف الأعمار لهذه الدراسه من أسواق الطيور المتعددة في مناطق مختلفة من محافظة ديالى وأربعين نموذج من دجاج بيض المائده (جالوس جالوس) يشتبه في إصابتها بجدري الحمام وجدري الدجاج على التوالي. تم الحصول على عينات الأنسجة من المناطق المصابة من الفتحات الشرجيه لهذه الطيور والعينين ومن الأجنحة والمنقار بعد القتل الرحيم ومعاملتها للفحص النسيجي والجزيئي. تم استخلاص الحمض النووي باستخدام العدة التشخيصيه من شركه (gSYNC™ ، كندا) لجزء من منطقة جين البروتين الأساسي (pb4). للكشف عن الجين المختار (p4b) ، تم تصميم زوجين من بادئات النوكليوتيد باستخدام برنامج خاص معد مسبقا من NCBI.
بعد تصميم البوادئ تم شرائها من قبل شركة (ماكروجين في كوريا الجنوبية) وتتكون من الجزءالتمهيدي الأمامي (5′AATCTTAGAAAAGACGCAGATGCT3′) والتمهيدي العكسي (5′AAGTTTGTTGATTGAAACCTAGTCG3′). تم فحص الحمض النووي لتضخيم جين البروتين الأساسي P4b ل APV. تم اتباع التسلسل لتحديد التنوع البيولوجي للأنماط المصلية السائدة من الدجاج والحمام في محافظة ديالى. ضمن هذا الموضع ، تم تسجيل ست عينات في الدراسة الحالية ، عينتان لفيروس جدري الدجاج (S2 و S3) ، وأربع عينات لفيروس جدري الطيور (S1 و S4 و S5 و S6). تم فحص هذه العينات لتضخيم تسلسل جينات P4b (البروتين الأساسي) لفيروسات جدري الدجاج وجدري الطيور ، على التوالي. تم تعريض الأجزاء المضخمة مباشرة برنامج ( سانجر) لتقييم نمط تعدد الأشكال الجيني فيما يتعلق بالعينات المفهرسه في قاعدة بيانات NCBI. بعد ذلك ، تم بناء شجرة شاملة محددة لتقييم التنميط المصلي الدقيق للمتغيرات المرصودة وتوزيعها التطوري.
أظهرت نتائج الدراسة الحالية أن العلامات السريرية تتميز بآفات عقيدية في المناطق الخالية من الريش ، والقشور المنتشرة حول الوجه والساقين والقدمين ، والجلد غير المصطبغ حول المنقار ، والجفون ، والساقين ، والعرف ، والدلايات ، والأجنحة. بينما كشفت نتيجة الفحص النسيجي المرضي للحمام المصاب بفيروس جدري الطيور عن تغيرات ملحوظة في البشرة ، بما في ذلك تضخم ,وانتفاخ الخلايا مع وجودأجسام محتواة حامضيه.
أظهر النسيج تحت الجلد تكاثر الخلايا النشط وتسلل الخلايا أحادية النواة متعددة الأشكال ، إلى جانب وجود اجسام محتواة حامضيه تدعى (أجسام بولينجر) مع توسع واضح ، بالإضافة إلى حدوث التليف وانتشار الخلايا الليفية في مناطق معينة. في حين أن التحليل النسيجي للدجاج المصاب بفيروس جدري الطيور كشف عن تغيرات في أنسجة البشرة التي أظهرت تضخم الخلايا الحرشفية الطبقية التي تتميز باالاشواك ، إلى جانب وجود كبير للخلايا المحتوية على الإفرازات الالتهابية.
كانت السمة البارزة التي لوحظت هي وجود هياكل داخل الهيولى غريبة من الاجسام المحتواة تعرف باسم أجسام بولينجر ، والتي تجلت في شكل شوائب دائرية وفراغ. أظهرت النتائج الجزيئية للدراسات الحالية باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل للكشف عن APV أن جميع العينات التي تم جمعها أعطت نتائج إيجابية من الحمام والدجاج. على 1.5٪ هلام الاكاروز حيث اظهرت جميع العينات شريط cDNA محدد من 329 bp. في هذه الدراسة ، تم الحصول على رقمين للانضمام إلى GenBank (OR619724 و OR619725) لتمثيل العينات الفيروسية لجدري الدجاج وهما (S2 و S3) على التوالي. كذلك ، تم الحصول على أربعة أرقام انضمام لبنك الجينات (OR670580 و OR670581 و OR670582 و OR670583) لتمثيل العينات الفيروسية لجدري الحمام الممثلة في (S1 و S4 و S5 و S6) على التوالي. فيما يتعلق ب 329 bp amplicons لفيروسات avipox ، أظهر محرك NCBI BLASTn حوالي 99٪ من أوجه التشابه في التسلسل بين العينة المتسلسلة وتسلسلات العزلات المفهرسه المقصوده. تم تحديد متغير واحد من الحمض النووي في كل من العينات الفيروسية لجدري الدجاج وجدري الطيور وهي (205C>G و 204T>C) ، مما أدى إلى ‘TVHJ متغيره وصامتة ((p.101Leu>Val و p.108Pro) على بروتينات معينة على التوالي.
اظهر مخطط الشجره الجينيه التي تم رسمها تسلسل العينات المحلية المدمجة في مجموعتين رئيسيتين من النشوء والتطور تمثلان فيروسات جدري الدجاج وفيروسات جدري الحمام. كشف تحليل النشوء والتطور أن عينات الدجاج والحمام كانت مناسبة في المنطقة المجاورة مباشرة للسلالات المعزولة من مناطق جغرافية مختلفة. تم وضع فيروسات جدري الدجاج بالقرب من جذر الشجرة ، مما يشير إلى علاقة أسلافهم من العتر الفايروسيه. ومع ذلك ، كانت عينات S2 و S3 التي تم فحصها مناسبة بالقرب من سلالات متغيرة وأظهرت تشابها مع سلالات من العراق(صلاح الدين) ومصر وإيران والبرازيل والهند والولايات المتحدة الأمريكية لجدري الدجاج. في حين أن عينات الحمام S1 و S4 و S5 و S6 ترتبط ارتباطا وثيقا بالسلالات المتغيرة المعزولة من أستراليا.
بناء على المعلومات المقدمة ، يمكن الاستنتاج أن الطيور الداجنة والبرية معرضة للإصابة بجدري الطيور ، وهو مرض فيروسي. أظهرت الدراسات النسيجية والجزيئية أن هذه العدوى يمكن أن تسبب درجات متفاوتة من الشدة ، مما يؤدي إلى تغيرات مرضية كبيرة في الطبقات الجلدية ، مما يؤثر بشكل خاص على أنسجة البشرة من الحمام والدجاج. أظهر الكشف الجزيئي من خلال الشجره الجينيه الى تصنيف تسلسلات العينات المحلية المدرجة إلى مجموعتين تطوريتين أوليتين ، تمثلان فيروسات جدري الدجاج وفيروسات جدري الحمام ، على التوالي. بالإضافة إلى ذلك ، لوحظت مجموعتان خارج المجموعة ، تحتويان على تسلسلات فيروسية أخرى.
