الخلاصة
أجريت هذه الدراسة في مختبر زراعة الخلايا والانسجة النباتية ومختبر الفطريات التابع لقسم علوم الحياة في كلية التربية للعلوم الصرفة بجامعة ديالى خلال المدة من أيلول / 2018 ولغاية أيار /2019، بهدف دراسة تأثير البروتين المثبط لفعالية الرايبوسومات المستخلصة من المزارع النسيجية و الأوراق الحقيقية لنبات القرنفل Dianthus caryophyllus اتجاه الفطر الممرض Rhizoctonia solani المسبب لمرض سقوط البادرات. بأستحثاث الكالس من الجزء الورقي المتصل بالساق لنبات القرنفل، اذ تم استحثاث الكالس على وسط MS مدعم بتراكيز 0.0 و0.5 و1.0 و 2.0 ملغم. لتر-1 من 2,4-Dichloro phenoxy Actic Acid (2,4-D )إشارت النتائج الى ان اعلى وزن طري والبالغ 0.4500 غم عند التراكيز 1.0 ملغم. لتر-1 من. 2,4-D وتم الاستحثاث الكالس على وسط MS مدعم بتراكيز 0.0 و0.5 و1.0 و 2.0 ملغم. لتر-1 من 2,4-D متداخل مع 0.5 ملغم. لتر-1 منBA اذ بينت النتائج ان اعلى وزن طري والبالغ 0.2400 غم عند التركيز1.0 ملغم. لتر-1 من 2,4-D متداخل مع 0.5 ملغم. لتر-1 من Benzyl adenine ( BA) . وتم الاستحثاث على وسط MS مدعم بتراكيز 0.0 و1.0 و2.5 و3.0 ملغم. لتر-1 من 2,4-D متداخل مع 0.5 ملغم. لتر-1 من Kin اشارت النتائج الى ان اعلى وزن طري والبالغ 0.5000 غم عند التركيز 2.5 ملغم . لتر-1 من2,4-D متداخل مع 0.5 ملغم. لتر-1 من Kinetin (Kin). وأشارت نتائج الاختبار عدة الأوساط للادامة ان افضل وسط لنمو مزارع الكالس كان على وسط MS المدعم بتركيز 1.0 ملغم.لتر-1 من Naphthalene acetic acid ( NAA ) متداخلا مع 0.5 ملغم. لتر-1 من Thidiazuron ( TDZ ). اشارت الدراسة الى إمكانية عزل وتشخيص الفطر R. soloni من درنات البطاطا، واظهرت النتائج القابلية الامراضية لها بدلالة انخفاض قيمة الانبات ونسبة موت البادرات قبل البزوغ والبالغة (50 و50 ) % على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة. أظهرت نتائج استخلاص بروتين المثبط لفعالية الرايبوسومات Ribosome-inactivating proteins (RIP) من الأوراق الحقيقية ومن مزارع الكالس النسيجية المستحث في أوراق نبات القرنفل Dianthus caryophyllus , اعطت المزارع النسيجية اعلى تركيز من البروتين والبالغ 388.25 ملغم/لتر بالمقارنة بالبروتين المستخلص من الأوراق الحقيقية والبالغ 175.33 ملغم/لتر. أظهرت نتائج معاملة الفطر R.soloni بتركيز مختلفة (0.25، 0.50 ملغم/لتر) من البروتين RIP تثبيط نمو الفطر خلال مدة الحضن إذ بلغ معدل قطر مستعمرة الفطر النامي على وسط PDA المدعم بتركيز0.25، 0.50 ملغم/لتر من البروتين RIP المستخلص من الأوراق الحقيقية 1.0، 0.6 سم على التوالي بعد 72 ساعة بالمقارنة ب 9 سم لمعاملة المقارنة بينما كان معدل قطر المستعمرة 2.3 و2.5 سم بعد 72 ساعة في معاملات التراكيز 0.25، 0.50 ملغم/لتر للبروتين RIP المستخلص من المزارع الكالس, في حين بلغ قطر المستعمرة 2.0، 3.0 سم عند استعمال التراكيز ذاتها من البروتين RIP الناتج من دمج النوعين المستخلصين من الأوراق ومزارع الكالس , الامر الذي انعكس بالنتيجة على بيانات الوزن الرطب والوزن الجاف المسجلة للفطر R.soloni ، والتي اظهرت انخفاض واضح في الاوزان الطرية والجافة للكتلة الحيوية للفطر في جميع الفترات الزمنية ولجميع التراكيز من البروتين RIP. وأشارت النتائج الى ان اعلى نسبة مئوية لقياس الاحماض الامينية للبروتين المستخلص من الكالس كان 14.70% عند التركيز 0.25 ملغم/لتر واقل نسبة %1.23 عند التركيز 0.50 ملغم/لتر، والى اعلى نسبة مئوية من الأوراق كانت 20.01% عند التركيز 0.50 ملغم/لتر واقل نسبة 2.05% عند التركيز 0.50 ملغم/لتر، واعلى نسبة مئوية لمزيجهما كانت 14.71% عند التركيز 0.25 ملغم/لتر واقل نسبة 1.58% عند التركيز 0.25 ملغم/لتر. أظهرت نتائج الفحص المجهري لمزارع الفطر النامية على وسط PDA المدعم بتراكيز مختلفة من البروتين RIP انخفاض في معدل قطر الخيط الفطري وحصول تشوهات في اطراف الخيط وتحلل في بعض مناطق الجدران الخلوية للخيط الفطري وحصول انبعاجات وعدم استقام للخيط الفطري فضلاً عن ظهور الاجسام البرميلية. أشارت نتائج تحليل محتوى الفطر من الاحماض الامينية الى حصول زيادة مجموع تراكيز الاحماض الامينية في مزارع الفطر النامية على وسط PDA المدعم بتراكيز مختلفة من البروتين RIP بالمقارنة بمعاملة المقارنة المستعملة بمزارع الفطر النامية على وسط PDA الذي لم يدعم بالبروتين .
