الخُلاصة
دُرست المقارنة الوراثية الجزيئية والكمية والحياتية بينَ نوعين من ذُبابة ثمار القرعيات في وسط العراق وهما Dacus ciliatus (Loew,1862) و(Dacus frontalis (Becker,1922 , والتي تمَ الحصول على عيناتهما من مختبر الإدارة المتكاملة للآفات / دائرة البحوث الزراعية / وزارة العلوم والتكنولوجيا بتأريخ23 /2/ 2019, إذ بلغت مدة الجيل الواحد لكل نوع 25 يوماً من البيضة إلى الحشرة الكاملة , وبعدَ الانتهاء من تربية حشرات كلا النوعين أجريت المقارنة الوراثية الجزيئية بينَ النوعين أعلاه اعتماداً على عذارى الجيل الثالث المعاملة بالتركيز نصف القاتل LC50 (0.250 ml/L)لأوكسيد المغنيسيوم النانوي وغير المعاملة من خلال استخلاص الـ DNA بواسطة عدة الاستخلاص Gnomic DNA Mini Kit-tissue وبواقع 20عينة قبلَ المعاملة و 20عينة بعدَ المعاملة لكلا النوعين . تراوحت نقاوة الـ DNA المستخلص لجميع العينات ما بينَ 1.8 إلى 2 نانوميتر، وبعدَ ذلكَ تمَ تضخيم قطعة من الجين لكل من الجينات COI ، CAD وEF-1 alpha بواسطة استعمال تقانة تفاعل أنزيم البلمرة المتسلسل PCR ، إذ أظهرت نتائج التَضخيم بأنَ الوزن الجزيئي للجينات الثلاثة هو350bp ، 310bpو450bp على التوالي لكل من عينات النوعين المعاملة وغيرالمعاملة ، بعدَ ذلكَ تمَ عمل التسلسل النيوكلوتيدي لكل جين من الجينات الثلاثة وبواقع 16عينة لكل جين مقسمة إلى8 عينات لكل نوع أي4 قبلَ المعاملة و4 بعدَ المعاملة . بينت نتائج تحليل التسلسل النيوكلوتيدي لكل جين من الجينات الثلاثة ولكلا النوعين وجود طفرات نقطية من نوع الحذف والاستبدال موزعة على مواقع مختلفة من التسلسل النيوكلوتيدي عندَ مقارنة عينات النوع الواحد المعاملة بالتركيز نصف القاتلLC50 لأوكسيد المغنيسيوم النانوي وغير المعاملة من جهة ومع عينات بنك الجينات المختارة في هذه الدراسة من جهة أخرى ، كما أظهرت نتائج تحليل التسلسل النيوكلوتيدي لكل جين من الجينات الثلاثة وجود طفرات نقطية من نوع الاستبدال في مواقع مختلفة من التسلسل النيوكلوتيدي عندَ مقارنة عينات النوع D.ciliatus مع عينات النوع D.frontalisالطبيعية غير المعاملة ، ومن خلال شجرة التقارب الوراثي Phylogenetic tree لوحظَ بأنَ قيمة البعد الوراثي بين عينات النـوع الواحد المعاملة بالتركيز النصف القاتل LC50 لأوكســــــيد المغنيسيوم النانوي وغيــــر المعاملة تســـــاوي 0.00 ولكن بينَ عينات كلا النوعين تساوي 0.03 ، 0.0023 و0.0013 للجينات COI ، CADوEF-1 alpha على التوالي من جهة ومع عينات بنك الجينات المختارة في هذهِ الدراسة 0.0085 ، 0.0093 و0.0024 للجينات الثلاثة على التوالي من جهة أخرى , أما من الناحية الوراثية الكمية فقد أجريت المقارنة بين النوعين باستعمال نظام المقياس الهندسي لشكل الجناح وتركيبه وهذا النظام يَعتمد على وضع إحداثيات للمعالم ما بينَ تقاطعات العروق الطولية معَ العروق المستعرضة ونهايات العروق الطولية للجناح ، حيث استعملَ في هذهِ الدراسة 30 جناح أيمن لكل نوع وبواقع 15 جناح أيمن للذكور و15جناح أيمن للإناث في كل تحليل . أنَ جميع المقارنات الوراثية الكمية ولكلا النوعين كانت على أجنحة حشرات الجيل الثالث والمعرضة في مرحلة العذراء إلى التركيز نصف القاتل LC50 لأوكسيد المغنيسيوم النانوي والحشرات الطبيعية غير المعرضة ، وقد أظهرت النتائج عندَ مقارنة ذكور النوع D.ciliatus المعاملة بالتركيز نصف القاتل معَ الذكور غير المعاملة بأنَ الحَجم المركزي للجناح الأيمن يساوي 850.8 و868.6 مايكرون على التوالي ، وأنَ قيمةF = 1.5 , P = 0.48 وقيمة T = 1.4 , P = 0.19 وقيمة الاختلاف المطلقة AD = 17.9, إذ توجد فروق معنوية إحصائية ، وعندَ المقارنة بينَ إناث نفس النوع المعاملة وغير المعاملة بلغت قيمة الحجم المركزي للجناح 859.8 و 839.4 مايكرون على التوالي ، وأنَ قيمة P = 2.3 F= 0.13 وقيمة T= 1.3 , P = 0.20وقيمة الاختلاف المطلقةAD = 20.4 , إذ توجد فروق معنوية إحصائية . بلغت قيمة مسافة مهالانوبز عندَ المقارنة بينَ كل من الذكور المعاملة وغير المعاملة والإناث المعاملة وغير المعاملة 9.49 و 9.38 على التوالي ، وكذلك توجد فروق معنوية إحصائية في تماثل شكل الجَناح وحجمهِ عندَ المقارنة بينَ الذكور المعاملة وغير المعاملة من جهة وبينَ الإناث المعاملة وغير المعاملة من جهة أخرى ففي الذكور عند تماثل شكل الجناح بلغت قيمة F = 2.23 , Signi = 0.14 ، أما في حالة تماثل حجم الجناح بلغت قيمة F=1.07 , Signi = 0.36 ، وفي الإناث في حالة تماثل شكل الجناح أنَ قيمةF = 1.30 Signi = 0.26 ، وفي تماثل حجم الجناح قيمة F = 2.22 , Signi = 0.00, أما عندَ مقارنة ذكور النوع D.frontalis المعاملة بالتركيز نصف القاتل مع الذكور غير المعاملة فأنَ الحجم المركزي للجناح الأيمن هو859.9 و837.9 مايكرون على التوالي ، وأنَ قيمة F = 1.7 , P = 0.32 وقيمةT = 1.5 , P = 0.15 وقيمة الاختلاف المطلقة AD = 22.1 إذ توجد فروق معنوية إحصائية ، وعندَ المقارنة بينَ إناث نفس النوع المعاملة وغير المعاملة بلغت قيمة الحجم المركزي للجناح الأيمن846.03 و873.04 مايكرون على التوالي ، وإنَ قيمة F= 1.8 , P = 0.30 وقيمة T = 2.02 , P = 0.01وقيمة الاختلاف المطلقة AD = 27.0 ، إذ توجد فروق معنوية إحصائية وبلغت قيمة مسافة مهالانوبز عندَ المقارنة بينَ كل من الذكور المعاملة وغير المعاملة والإناث المعاملة وغير المعاملة 12.93 و13.05على التوالي ، وكذلكَ توجد فروق معنوية إحصائية في تماثل شكل الجناح وحجمهُ عندَ المقارنة بينَ الذكور المعاملة وغير المعاملة من جهة وبينَ الإناث المعاملة وغير المعاملة من جهة أخرى , ففي الذكور في حالة تماثل شكل الجناح بلغت قيمة F= 0.19 Signi = 0.15 , أما في حالة تماثل حجم الجناح بلغت قيمة F= 0.91 , Signi = 0.59، وفي الإناث في حالة تماثل شكل الجناح أنَ قيمة F=9.09 , Signi = 0.00، وفي تماثل حجم الجناح قيمة F = 1.84 Signi = 0.00 . عندَ المقارنة بينَ ذكور وإناث D.ciliatus وD.frontalis قبلَ المعاملة وبعدَ بالمعاملة بالتركيز نصف القاتل لأوكسيد المغنيسيوم النانوي أظهرت النتائج وجود فروق معنوية في معدل الحجم المركزي للجناح الأيمن وكذلكَ في قيمة مسافة مهالانوبز وتماثل شكل وحجم الجناح لكل من ذكور وإناث كلا النوعين ، إذا بلغَ معدل الحجم المركزي للجناح عندَ المقارنة بين ذكور النوعين غير المعاملة 850.73 و859.95 مايكرون على التوالي وقيمة F = 1.17 , P = 0.76 وقيمة T = 0.37 , P = 0.46 وقيمة الاختلاف المطلقة AD = 9.2 ، أما عندَ المقارنة بينَ إناث النوعين غير المعاملة بلغَ معدل الحجم المركزي للجناح 859.82و 846.03مايكرون على التوالي وقيمة P=1.41 , F = 0.44 وقيمة T= 0.81 , P = 42 وقيمة الاختلاف المطلقة AD = 13.8، أما قيمة مسافة مهالانوبز بينَ ذكور كلا النوعين من جهة وبينَ إناث كلا النوعين من جهة أخرى هي 10.33و 22.01 على التوالي ، وقيمة F المعنوية لتماثل شكل الجناح بينَ ذكور النوعين غير المعاملة هي F=1.53 , Signi = 0.22 , أما بالنسبة لإناث النوعين غير المعاملة هيSigni= 0.06 , F= 3.79، وقيمة F المعنوية لتماثل حجم الجناح هيSigni= 0.82 , F= 0.74 , أما بالنسبة لإناث كلا النوعين الطبيعية هي Signi= 0.81 , F= 0.73 , أما عندَ المقارنة بينَ ذكور وإناث D.ciliatus و D.frontalisبعدَ بالمعاملة بالتركيز نصف القاتل لأوكسيد المغنيسيوم النانوي , إذ بلغَ معدل الحجم المركزي للجناح عندَ المقارنة بينَ ذكور النوعين المعاملة 868.67 و837.88 مايكرون على التوالي وقيمة F = 1.4 , P = 0.56 وقيمة T=1.95 P = 0.06 وقيمة الاختلاف المطلقة AD = 30.8، أما عندَ المقارنة بينَ إناث النوعين المعاملة بلغَ معدل الحجم المركزي للجناح 839.40 و873.04 مايكرون على التوالي وقيمة F = 1.2 , P= 0.79 وقيمة T=2.09 , P = 0.01 وقيمة الاختلاف المطلقة AD = 33.64، أما قيمة مسافة مهالانوبز بينَ ذكور كلا النوعين المعاملة من جهة وبينَ إناث كلا النوعين المعاملة من جهة أخرى هي 11.92 و9.84 على التوالي ، وقيمة F المعنوية لتماثل شكل الجناح بينَ ذكور النوعين المعاملة هيF= 0.00 , Signi = 0.99, أما بالنسبة للإناث المعاملة هيSigni =0.57 , F= 0.33 وقيمة F المعنوية لتماثل حجم الجناح بينَ ذكور النوعين المعاملة هي Signi= 0.46 , F=1.00 , أما بالنسبة للإناث المعاملة هي Signi= 0.76 , F = 0.79, أما من الناحية الحياتية تمَ اختبار تأثير تراكيز مختلفة من أوكسيد المغنيسيوم وأوكسيد التيتانيوم النانوي وهي0.125 ، 0.250 و0.500 مل/لتر على معدل الهلاك التراكمي لليرقات ، العذارى والكاملات لكل من النوعين D.ciliatus وD.frontalis , إذ تمَ استعمال ثلاثة مكررات لكل تركيز وفي كل مكرر خمسة يرقات وكذلك الحال بالنسبة للعذارى ، أما بالنسبة للكاملات أخذت ثلاثة مكررات لكل تركيز وفي كل مكرر ذكرين وأنثى واحدة ولكلا النوعين ، إذ بينت النتائج أنَ أعلى معدل هلاك تراكمي ليرقات كلا النوعين كانَ عندَ التركيز 0.500 لأوكسيد المغنيسيوم النانوي وهو 18.89 ، 17.82على التوالي ، وأقل معدل هلاك تراكمي كانَ عندَ التركيز0.125 وهو15.63 ، 10.42على التوالي ، وأنَ معدل الهلاك التراكمي لعذارى وكاملات النوعين كانَ أيضاً عندَ التركيز0.500 وهو19.87 ، 15.72على التوالي بالنسبة لعذارى النوعين , أما بالنسبة للكاملات كانَ 17.93 و14.94على التوالي ، وأقل معدل هلاك تراكمي لعذارى وكاملات النوعين كانَ عندَ التركيز 0.125وهو12.52 ، 8.33 على التوالي بالنسبة للعذارى , أما بالنسبة لكاملات النوعين هو13.73 و11.55على التوالي ، إذ لوحظَ وجود فروق معنوية إحصائية بينَ تراكيز النوعين عندَ استعمال اختبار دنكن متعدد الحدود وعندَ مستوى معنوية P< 0.05)) , وأيضاً أظهرت النتائج عندَ استعمال أوكسيد التيتانيوم والمغنسيوم النانوي أنَ أعلى معدل هلاك تراكمي ليرقات كلا النوعين كان عندَ التركيز 0.500 وهو17.72 و17.73على التوالي ، وأقل معدل هلاك تراكمي كانَ عندَ التركيز 0.125 وهو11.41 و6.37 على التوالي ، وأنَ معدل الهلاك التراكمي لعذارى وكاملات النوعين D.ciliatus وD.frontalis كانَ أيضاً عندَ التركيز 0.500 , إذ بلغ 16.84 ، 17.82على التوالي بالنسبة لعذارى النوعين , أما بالنسبة لكاملات النوعين بلغ المعدل 18.79 و18.90على التوالي ، وأقل معدل هلاك تراكمي لعذارى وكاملات النوعين كان التركيز 0.125 وهو7.17 و10.25 على التوالي بالنسبة للعذارى , أما بالنسبة لكاملات النوعين هو 12.72 و12.50 على التوالي ، إذ لوحظَ وجود فروق معنوية إحصائية , وعندَ المقارنة بينَ أوكسيد المغنيسيوم وأوكسيدالتيتانيوم النانوي من ناحية التأثير على نسبة الهلاك التراكمي لكل من يرقات وعذارى وكاملات النوعين لوحظَ أنَ أوكسيد المغنيسيوم أفضل من أوكسيد التيتانيوم لأنهُ أعطى أعلى نسب هلاك تراكمي عندَ التركيز0.500 بلغت 0.98 , 0.98 و0.92 للنوع D.ciliatus , أما بالنسبة للنوع D.frontalis فكانت تساوي 0.84 ، 0.84 و 0.77لليرقات , العذارى والكاملات على التوالي ، بينما أعطى اوكسيد التيتانيوم أعلى نسب هلاك تراكمي أيضاً عندَ التركيز0.500 وهي0.90 ، 0.85 و 0.86للنوع D.ciliatus، أما بالنسبة للنوع D.frontalis فكانت تساوي0.85 ، 0.86 و0.99 لليرقات , العذارى والكاملات على التوالي , وكذلكَ أظهَرت النتائج أنَ معاملة كاملات وعذارى كلا النوعين بالتركيز 0.500 لأوكسيد المغنيسيوم والتيتانيوم النانوي يؤدي إلى إنخفاض عدد البيض للأنثى الواحدة وكذلكَ إلى فشل التعذر والتحول إلى كاملات لكلا النوعين .
